双氢睾酮体外培养人毛囊中差异表达的miR-133b对人毛乳头细胞的增殖及诱导能力的影响
双氢睾酮体外培养人毛囊中差异表达的miR-133b对人毛乳头细胞的增殖及诱导能力的影响
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DOI：
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发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
万苗坚
中科院分区：
文献类型：
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作者：
邓文佳;邓长健;韩乐;刘本;唐鑫;万苗坚
【目的】探究不同浓度双氢睾酮(DHT)对毛囊生长和毛囊细胞增殖的影响及其与miR-133b表达的关系,然后进一步探究miR-133b对毛乳头细胞的增殖和诱导能力的影响。【方法】体外显微分离人毛囊,选取生长期的毛囊进行培养,显微镜下每日测量并拍摄不同浓度的DHT处理组(10-8、10-7、10-6和10-5 mol/L)和对照组各组毛囊的生长长度,免疫荧光检测各组毛母质细胞Ki-67表达量评估毛囊增殖能力,qRT-PCR检测各组毛囊中miR-133b的表达量。通过Lipofectamine 2000转染miR-133b mimics及miR-133b NC至人毛乳头细胞中,CCK-8检测各组人毛乳头细胞增殖能力,qRT-PCR及Western Blot检测毛乳头细胞诱导能力指标Versican、ALP、β-catenin的mRNA及蛋白水平的相对表达量。【结果】与对照组相比,DHT 10-5 mol/L实验组对毛囊的生长的抑制作用有统计学意义(P< 0.05),DHT 10-5 mol/L实验组进入退行期的时间提前;其他组生长长度与对照组相比无统计学意义。免疫荧光及qRT-PCR显示,与对照组相比,DHT 10-5 mol/L实验组毛母质细胞中Ki-67阳性细胞较少且毛囊中miR-133b的相对表达量明显升高,相当于对照组的(3.17±0.26)倍(P<0.01)。CCK-8显示,miR-133b mimics组OD450低于miR- 133b NC组(P<0.05);qRT-PCR显示,在mRNA水平,miR-133b mimics组Versican、ALP、β-catenin的相对表达量均低于miR-133b NC组(P<0.001、P<0.01和P<0.01)。Western blot显示,在蛋白水平,miR-133b mimics组Versican、 ALP、β-catenin的相对表达量同样均低于miR-133b NC组(P<0.01、P<0.001和P<0.01)。【结论】高浓度DHT可能通过调控miR-133b的表达抑制人毛乳头细胞的增殖活性及诱导能力,最终抑制人毛囊的生长及增殖。