An analysis of critical factors for quantitative immunoblotting.
An analysis of critical factors for quantitative immunoblotting.
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DOI：
10.1126/scisignal.2005966
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发表时间：
2015-04-07
影响因子：
7.3
通讯作者：
Janes KA
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Janes KA
免疫印迹（也称为蛋白质印迹）结合数字图像分析可以是分析蛋白质丰度和蛋白质修饰的可靠方法，但并非每种免疫印迹分析组合都能产生准确的结果。在这里，我说明了如何样品制备，协议的实施，检测方案和规范化方法深刻影响免疫印迹的定量性能。本研究实施了诊断实验，评估免疫印迹分析工作流程的准确性和精密度。结果表明，忽略这种诊断可能会导致假定量免疫印迹数据，大大高估或低估蛋白质丰度的真实差异。
Immunoblotting (also known as Western blotting) combined with digital image analysis can be a reliable method for analyzing the abundance of proteins and protein modifications, but not every immunoblot-analysis combination produces an accurate result. Here, I illustrate how sample preparation, protocol implementation, detection scheme, and normalization approach profoundly affect the quantitative performance of immunoblotting. This study implemented diagnostic experiments that assess an immunoblot-analysis workflow for accuracy and precision. The results showed that ignoring such diagnostics can lead to pseudoquantitative immunoblot data that dramatically overestimate or underestimate true differences in protein abundance.
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DOI：
10.1073/pnas.1311647111
发表时间：
2014-02-04
影响因子：
11.1
作者：
Bajikar, Sameer S.;Fuchs, Christiane;Janes, Kevin A.
通讯作者：
Janes, Kevin A.
影响因子：
11.2
作者：
Hsu YH;Yao J;Chan LC;Wu TJ;Hsu JL;Fang YF;Wei Y;Wu Y;Huang WC;Liu CL;Chang YC;Wang MY;Li CW;Shen J;Chen MK;Sahin AA;Sood A;Mills GB;Yu D;Hortobagyi GN;Hung MC
通讯作者：
Hung MC
影响因子：
2.9
作者：
KAUFMANN, SH;EWING, CM;SHAPER, JH
通讯作者：
SHAPER, JH
影响因子：
3.5
作者：
MACKINTOSH, C;BEATTIE, KA;CODD, GA
通讯作者：
CODD, GA
影响因子：
4
作者：
Janes, Kevin A.;Lauffenburger, Douglas A.
通讯作者：
Lauffenburger, Douglas A.