大豆GmbZIP33基因启动子的克隆及瞬时表达分析

大豆GmbZIP33基因启动子的克隆及瞬时表达分析
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DOI:
10.11861/j.issn.1000-9841.2019.04.0511
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发表时间:
2019
期刊:
大豆科学
影响因子:
--
通讯作者:
冯永君
冯永君
中科院分区:
其他
文献类型:
--
作者:
白丽娟;刘薇;王志莉;王文婷;吴存祥;冯永君

文献摘要

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启动子作为基因调控的重要元件,决定着下游基因表达的时空和强度特性。为研究大豆GmbZIP33基因启动子功能,在前期克隆获得GmbZIP33基因(Glyma 03G219300.1)序列的基础上,通过N-PCR(nested PCR)技术克隆了GmbZIP33 CDS上游启动子区序列(2 316 bp)。利用PlantCARE在线分析软件进行顺式作用元件的预测,发现该序列上除含有TATA-boX和CAAT-box等核心调控元件外,同时包括与抗逆、光响应、激素响应、蔗糖应答元件和多个与组织特异性表达相关的元件。为研究GmbZIP33启动子的表达调控特性,构建了该启动子调控报告基因GUS表达的载体,并利用农杆菌介导的花序浸染法将其转入拟南芥中,发现该启动子驱动下的GUS基因在不同组织(莲座叶、花、荚果和根)的维管束中均特异性表达;对转基因拟南芥进行实时荧光定量PCR检测发现,GUS基因在花中表达量最高,荚果中次之,表明GmbZIP33基因可能受到多种因素和蔗糖的调节并参与花荚发育的调控。