Autocrine regulation of erythropoietin gene expression in human hepatocellular carcinoma cells.
Autocrine regulation of erythropoietin gene expression in human hepatocellular carcinoma cells.
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人肝细胞癌细胞中促红细胞生成素基因表达的自分泌调节。
DOI：
10.1016/0024-3205(95)02307-0
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发表时间：
1995
期刊：
影响因子：
6.1
通讯作者：
J. Fisher
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
T. Ohigashi;K. Yoshioka;J. Fisher
我们以前曾报道过，在Hep 3B细胞培养物中，可以证明红细胞生成素（Epo）的产生在缺氧时显著增加（1）。为了确定这种增加是否涉及自分泌机制，我们研究了纯化的人重组Epo（rHuEpo）对Epo生产的影响。在常氧（20%O2）条件下，纯化的rHuEpo（5-80 mU/ml）在Hep 3B细胞培养物中产生高于Epo对照水平的显著增加。Hep 3B细胞与rHuEpo的低氧（1%O2）孵育引起EpomRNA超过对照水平的增加。Hep 3B细胞也表达Epo受体（Epo-R）转录本。使用[125 I]-Epo的结合研究显示，Hep 3B细胞含有单一类别的结合位点（kd = 2.9 nmol/rmL和Bmax = 1760个位点/细胞）。抗促红细胞生成素受体单克隆抗体可抑制rHuEpo诱导的Epo中等水平的升高，并阻断[125 I]-Epo与Hep 3B细胞膜的结合。这些结果表明，EpomRNA的表达可以控制，至少部分地，通过自分泌机制。
We have previously reported that a marked increase in erythropoietin (Epo) production can be demonstrated in Hep3B cell cultures in response to hypoxia (1). In order to determine whether this increase involves an autocrine mechanism, we have investigated the effects of purified human recombinant Epo (rHuEpo) on Epo production. Purified rHuEpo (5–80 mU/ml) produced a significant increase above control levels of Epo in Hep3B cell cultures under normoxic (20% O2) conditions. Hypoxie (1% O2) incubation of Hep3B cells with rHuEpo caused an increase over control levels of EpomRNA. Hep3B cells also expressed Epo receptor (Epo-R) transcripts. Binding studies using [125I]-Epo revealed that Hep3B cells contain a single class of binding site (kd = 2.9 nmol/rmL and Bmax = 1760 sites/cell). Antierythropoietin receptor monoclonal antibody inhibited the rHuEpo induced elevation in medium levels of Epo and blocked [125I]-Epo binding to Hep3B cell membranes. These results demonstrate that the expression of EpomRNA may be controlled, at least in part, by an autocrine mechanism.
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