Gene amplification and qRT-PCR.
Gene amplification and qRT-PCR.
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基因扩增和 qRT-PCR。
DOI：
10.1007/978-1-4939-0473-0_35
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发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
Jones C
中科院分区：
文献类型：
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作者：
Jones C
本章包括了在假单胞菌中使用聚合酶链反应（PCR）的方法，以及在这种微生物中成功应用的几个具体技巧。本章的第一部分包括从假单胞菌中纯化基因组DNA和扩增基因的方法，以及描述如何制备用于菌落PCR反应的假单胞菌细胞裂解物的方法。本章继续重点从DNA到RNA的转换，描述了从假单胞菌中分离RNA的方法，cDNA的产生，最后是q-RT-PCR来研究基因表达的相对变化。
This chapter includes methods for the use of the polymerase chain reaction (PCR) withPseudomonas, and several specific tips for their successful application in this organism. The first part of the chapter includes methods for purifying genomic DNA from, and amplifying genes from,Pseudomonas, in addition to methods which describe how to prepare a cell lysate fromPseudomonasspecies for colony PCR reactions. The chapter continues with a switch in focus from DNA to RNA, describing methods for RNA isolation fromPseudomonas, cDNA generation, and finally q-RT-PCR to investigate relative changes in gene expression.