Directed evolution of the nonribosomal peptide synthetase AdmK generates new andrimid derivatives in vivo.
Directed evolution of the nonribosomal peptide synthetase AdmK generates new andrimid derivatives in vivo.
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DOI：
10.1016/j.chembiol.2011.03.008
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发表时间：
2011-05-27
影响因子：
--
通讯作者：
Kelleher NL
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Evans BS;Chen Y;Metcalf WW;Zhao H;Kelleher NL
许多寻找新药的先导化合物来自多肽和聚酮，它们类似的生物合成酶很难用于生产新的衍生品。在一次实验中产生多个类似物的问题，以及缺乏基于结构的高通量筛选方法，减缓了这一领域的进展。在这里，我们使用定向进化和多重分析来筛选14,000个成员的文库，以产生三个新的抗菌化合物的衍生物，雄胺。对这些次级代谢的巨型酶进行重组的另一个限制因素是，常用的宿主如大肠杆菌通常提供较低的产品效价，因此我们的重组是在本地生产商聚集泛亚中进行的。这种集成的“体内”方法可以扩展到更大的酶，以创建用于生物活性测试的天然产品的类似物。
Many lead compounds in the search for new drugs derive from peptides and polyketides whose similar biosynthetic enzymes have been difficult to engineer for production of new derivatives. Problems with generating multiple analogs in a single experiment along with lack of high-throughput methods for structure-based screening have slowed progress in this area. Here, we use directed evolution and a multiplexed assay to screen a library of >14,000 members to generate three new derivatives of the antibacterial compound, andrimid. Another limiting factor in reengineering these mega-enzymes of secondary metabolism has been that commonly used hosts such as Escherichia coli often give lower product titers, so our reengineering was performed in the native producer, Pantoea agglomerans. This integrated “in vivo” approach can be extended to larger enzymes to create analogues of natural products for bioactivity testing.
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影响因子：
4.9
作者：
Freiberg, C.;Pohlmann, J.;Ziegelbauer, K.
通讯作者：
Ziegelbauer, K.
影响因子：
--
作者：
Doekel, S;Marahiel, MA
通讯作者：
Marahiel, MA
影响因子：
--
作者：
Challis, GL;Ravel, J;Townsend, CA
通讯作者：
Townsend, CA
DOI：
10.1007/s10295-005-0030-y
发表时间：
2006-02-01
影响因子：
3.4
作者：
Baltz, RH;Brian, P;Wrigley, SK
通讯作者：
Wrigley, SK
影响因子：
56.9
作者：
Belshaw, PJ;Walsh, CT;Stachelhaus, T
通讯作者：
Stachelhaus, T