牛HSL基因shRNA干扰载体的构建及筛选
牛HSL基因shRNA干扰载体的构建及筛选
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DOI：
10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.03.21
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发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
赵志辉
中科院分区：
文献类型：
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作者：
靳子康;房希碧;高振;潘子意;刘娟;姜平;杨润军;赵志辉
HSL基因所编码的激素敏感性脂酶对脂质代谢具有重要的调控作用,不仅能催化水解脂肪组织中的甘油三酯,还能水解不同组织的胆固醇酯,在机体能量供应和类固醇生成中发挥重要作用。为进一步研究HSL基因功能,本试验设计并构建4个HSL基因shRNA干扰载体,并将干扰载体转染到牛胎儿成纤维细胞中以及和设计构建过表达载体共转染到293T细胞中,转染48h后,分别检测细胞内牛HSL基因的mRNA和蛋白质表达水平,筛选出具有较高干扰效率的shRNA表达载体。结果表明,在牛胎儿成纤维细胞中,4个shRNA载体在转染48h后,shRNA-731组细胞中HSL基因的mRNA表达量显著低于shRNA NC对照组(P<0.05),且干扰效率最佳;同时,在shRNA载体与过表达载体共转染293T细胞中,HSL基因的mRNA和蛋白表达水平显著低于shRNA NC对照组(P<0.05)。本研究为进一步探讨HSL基因功能提供了有效工具,也为研究其与牛脂肪代谢相关关系奠定了理论基础。