Crystal structures of chicken liver dihydrofolate reductase: binary thioNADP+ and ternary thioNADP+.biopterin complexes.
Crystal structures of chicken liver dihydrofolate reductase: binary thioNADP+ and ternary thioNADP+.biopterin complexes.
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鸡肝二氢叶酸还原酶的晶体结构：二元硫代NADP和三元硫代NADP.生物蝶呤复合物。
DOI：
10.1021/bi00078a008
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发表时间：
1993
期刊：
影响因子：
2.9
通讯作者：
Kraut,J
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
McTigue,MA;Davies2nd,JF;Kaufman,BT;Kraut,J
材料和方法ThioNADP+二元复合物。如前所述（考夫曼和Kemerer，1977），从鸡肝中纯化二氢叶酸还原酶。通过与用于cDHFR-NADPH复合物结晶的程序类似的程序生长晶体（Volz等人，1982年）。将含有15 mg/mL cDHFR、2 mM硫代NADP+的200 mL溶液等分试样（Sigma Chemical）、10 mM乙酸钙、2 mM二硫苏糖醇和20 mM缓冲于pH 7.5的Tris-HCl置于1-mL烧杯中，将烧杯置于悬浮在玻璃皿内的平台上，高于15 mL含有23%（v/v）乙醇、10 mM乙酸钙、和20 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）。盖上结晶皿，在4 ℃下通过蒸汽扩散使蛋白质溶液与储库溶液平衡。3天内出现了属于空间群C2的大晶体（~ 1.2 X 0.5 X 0.3 mm），其中a- 89.0 k，B= 48.2 k，c= 64.1 x，ß= 124.6。将选择用于数据收集的晶体在含有40%乙醇、10 mM乙酸钙、2 mM thioNADP+和20 mM Tris-HCl的pH 7.5缓冲溶液中冲洗，然后将其固定在玻璃毛细管中。使用UCSD多线区域检测器（Cork等人，1973; Xuong等人，1985年）。在用当地开发的程序（安德森，1987）处理数据后，对于包含87%的所有独特反射的数据集，Riym 3为0.03，布拉格间距为2.3 μ m。
MATERIALS AND METHODSThe ThioNADP+ Binary Complex. Dihydrofolate reduc-tase was purified from chicken livers as previously described (Kaufman & Kemerer, 1977). Crystals were grown by a procedure similar to that used for crystallization of the cDHFR-NADPH complex (Volz et al., 1982). A 200-mL aliquot of a solution containing 15 mg/mL cDHFR, 2 mM thioNADP+(Sigma Chemical), 10 mM calcium acetate, 2 mM dithiothreitol, and 20 mM Tris-HCl buffered at pH 7.5 was put in a 1-mL beaker, which was placed on a platform suspended inside a glass dish above 15 mL of a reservoir solution containing 23%(v/v) ethanol, 10 mM calcium acetate, and 20 mM Tris-HCl bufferedat pH 7.5. The crystallization dish was covered, and theprotein solution was allowed to equilibrate with the reservoir solution by vapor diffusion at 4 C. Large crystals (~ 1.2 X 0.5 X 0.3 mm) belonging to space group C2 with a- 89.0 k, b= 48.2 k, c= 64.1 Á, and ß= 124.6 appeared within 3 days. Crystals chosen for data collection were rinsed in a solution containing 40% ethanol, 10 mM calcium acetate, 2 mM thioNADP" 1", and 20 mM Tris-HCl buffered at pH 7.5 before they were mounted in glass capillaries. A set of reflectionintensities comprising 24 984 observations of 8627 unique reflections was collected on one crystal at ambient temperature (~ 20 C) using the UCSD Multiwire Area Detector (Cork et al., 1973; Xuong et al., 1985). After the data were processed by locally developed programs (Anderson, 1987), the Riym3 was 0.03 for a data set containing 87% of all unique reflections to a Bragg spacing of 2.3 Á.
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DOI：
10.2210/pdb3dfr/pdb
发表时间：
1982-11
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
J. Bolin;D. Filman;D. Matthews;R. Hamlin;J. Kraut
通讯作者：
J. Bolin;D. Filman;D. Matthews;R. Hamlin;J. Kraut
氧化辅酶与干酪乳杆菌二氢叶酸还原酶结合的 Phosphorus-31 核磁共振研究。
影响因子：
2.9
作者：
E. Hyde;B. Birdsall;G. Roberts;J. Feeney;A. Burgen
通讯作者：
A. Burgen
辅酶类似物对对氨基苯甲酰基-L-谷氨酸和2,4-二氨基嘧啶与干酪乳杆菌二氢叶酸还原酶结合的影响。
影响因子：
2.9
作者：
B. Birdsall;A. Burgen;G. Roberts
通讯作者：
G. Roberts
生物蝶呤辅因子的立体化学和用于测定生物活性 5,6,7,8-四氢蝶呤立体化学的简便方法。
影响因子：
2.7
作者：
S. Matsuura;T. Sugimoto;S. Murata;Y. Sugawara;H. Iwasaki
通讯作者：
H. Iwasaki
来自抗甲氨蝶呤干酪乳杆菌的二氢叶酸还原酶。
影响因子：
3.9
作者：
T. Williams;T. K. Lee;R. Dunlap
通讯作者：
R. Dunlap