Functional characterization of a 48 kDa Trypanosoma brucei cap 2 RNA methyltransferase.
Functional characterization of a 48 kDa Trypanosoma brucei cap 2 RNA methyltransferase.
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Brucei Cap 2 RNA甲基转移酶的48 kDa锥虫瘤的功能表征。
DOI：
10.1093/nar/gkl573
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发表时间：
2006
影响因子：
14.9
通讯作者：
Ho, C. Kiong
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Hall, Megan P.;Ho, C. Kiong
动体mRNAs具有独特的高甲基化帽4结构，其衍生自标准m7 GpppN帽结构，在前四个核糖上具有2′-O甲基化，在第一个腺嘌呤和第四个尿嘧啶上具有额外的碱基甲基化。虽然负责m7 GpppN cap 0形成的酶已在布氏锥虫中表征，但cap 4甲基化的机制和超甲基化结构的作用仍不清楚。在这里，我们描述了一个48 kDa的布氏锥虫2′-O核苷甲基转移酶（TbCom 1）的特性。重组TbCom 1将S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosylmethionine，TbMet）的甲基转移到m7 GpppNpNp-RNA第二个核苷的2′-OH上，形成m7 GpppNpNmp-RNA。TbCom 1也能够将cap 1 RNA转化为cap 2 RNA。甲基转移反应依赖于m7 GpppN帽，因为该酶不与GpppN终止的RNA形成稳定的相互作用。突变分析确定TbCom 1和牛痘病毒VP 39甲基转移酶在TbCom 1-Met和Cap-识别中具有相似的机制。两个芳香族残基，Tyr 18和Tyr 187，可以参与与帽的鸟嘌呤环的碱基堆积相互作用，因为这些芳香族侧链中的每一个的去除消除帽特异性RNA结合。
Kinetoplastid mRNAs possess a unique hypermethylated cap 4 structure derived from the standard m7GpppN cap structure, with 2′-O methylations on the first four ribose sugars and additional base methylations on the first adenine and the fourth uracil. While the enzymes responsible for m7GpppN cap 0 formations has been characterized in Trypanosoma brucei, the mechanism of cap 4 methylation and the role of the hypermethylated structure remain unclear. Here, we describe the characterization of a 48 kDa T.brucei 2′-O nucleoside methyltransferase (TbCom1). Recombinant TbCom1 transfers the methyl group from S-adenosylmethionine (AdoMet) to the 2′-OH of the second nucleoside of m7GpppNpNp-RNA to form m7GpppNpNmp-RNA. TbCom1 is also capable of converting cap 1 RNA to cap 2 RNA. The methyl transfer reaction is dependent on the m7GpppN cap, as the enzyme does not form a stable interaction with GpppN-terminated RNA. Mutational analysis establishes that the TbCom1 and vaccinia virus VP39 methyltransferases share mechanistic similarities in AdoMet- and cap-recognition. Two aromatic residues, Tyr18 and Tyr187, may participate in base-stacking interactions with the guanine ring of the cap, as the removal of each of these aromatic side-chains abolishes cap-specific RNA-binding.
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影响因子：
4.8
作者：
Ho, CK;Sriskanda, V;Shuman, S
通讯作者：
Shuman, S
影响因子：
64.5
作者：
Marcotrigiano, J;Gingras, AC;Burley, SK
通讯作者：
Burley, SK
影响因子：
4.5
作者：
Arhin, GK;Li, HJ;Tschudi, C
通讯作者：
Tschudi, C
影响因子：
5.3
作者：
Li, HJ;Tschudi, C
通讯作者：
Tschudi, C
DOI：
10.1038/nsb0997-717
发表时间：
1997-09-01
期刊：
NATURE STRUCTURAL BIOLOGY
影响因子：
--
作者：
Matsuo, H;Li, HJ;Wagner, G
通讯作者：
Wagner, G