地西他滨对人急性髓系白血病细胞株HL-60的调控作用及其机制研究
地西他滨对人急性髓系白血病细胞株HL-60的调控作用及其机制研究
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DOI：
10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2017.10.002
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发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
卢绪章
中科院分区：
文献类型：
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作者：
马玲娣;朱志超;林贵斌;王健;曹佳淋;蒋丽佳;白煜;卢绪章
目的 研究去甲基化药物DAC对人急性白血病HL-60细胞的体外生长及NK细胞活化性受体NKG2D配体分子的表达调节作用，并初步探讨其分子机制。.方法CCK-8法观察不同浓度DAC对HL-60细胞的体外增殖活性，Annexin-V/PI双标法分析HL-60细胞凋亡改变。流式细胞术检测DAC处理前后HL-60细胞表面NK细胞活化性受体NKG2D配体(NKG2DL) MICA/B、ULBPs分子的表达，CFSE法检测NK细胞的杀伤活性。Western blot分析细胞内JAK/STAT3通路中STAT3、STAT3上游激酶JAK1、JAK2及STAT3活性负调控因子SOCS1、SOCS3的蛋白表达水平。HRM检测DAC处理后SOCS1、SOCS3基因甲基化程度。.结果DAC对HL-60细胞体外增殖具有明显抑制效应。0.2、0.5和1.0 mol/L DAC处理48hr，HL-60细胞活力较对照分别下降25±13%、39±8%和50±7%（p<0.01）；细胞早期凋亡发生率分别为24.77±7.5%、27.1±4.48%和30.53±3.93%，均较对照组细胞(3.11±0.12)%有明显增加（p<0.01）。DAC处理可诱导HL-60细胞表面NKG2D配体MICA/B、ULBP-1及ULBP-3分子的表达增高，增强HL-60对NK细胞的杀伤敏感性。Western blot结果显示，DAC处理后STAT3、JAK1、JAK2及磷酸化STAT3、JAK1、JAK2表达下降，SOCS1和SOCS3蛋白的表达增高。HRM结果显示，DAC是通过去除SOCS3基因甲基化程度发挥作用的。