核酸质谱技术检测常见念珠菌血症病原菌
核酸质谱技术检测常见念珠菌血症病原菌
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发表时间：
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期刊：
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通讯作者：
王成彬
中科院分区：
文献类型：
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作者：
李航逸;郭超敏;王成彬
【摘要】目的 联合聚合酶链反应与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术，构建检测5种临床常见念珠菌血症病原菌的高通量检测方法。方法 选择白色念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌，以内转录间隔区为靶基因，设计特异的单碱基延伸引物，在同一反应体系内进行单碱基延伸反应，用MALDI-TOF MS检测各目的菌特征峰；使用模拟血流感染样本及108例疑似或确诊念珠菌血症患者血液验证上述构建的检测体系敏感度、特异度；并将核酸质谱检测结果与金标准 培养方法进行比较。 结果 用所建立的核酸质谱检测体系同时检测5种临床常见念珠菌，各菌种均可产生特异的产物峰且各菌种之间不存在相互干扰。白色念珠菌的最低检测限可达100 CFU/ml，近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌的最低检测限可达10 CFU/ml。对108份血液样本进行检测，核酸质谱的敏感度为94.74%（36/38），特异度为97.14%（68/70），阳性预测值为92.31%（36/39），阴性预测值为98.55%（68/69），与培养方法结果一致性良好 。结论 成功构建了适用临床念珠菌检测的核酸质谱检测体系，方法验证结果与临床金标准 具有一致性。