中性粒细胞胞外诱捕网放大脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应
中性粒细胞胞外诱捕网放大脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应
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DOI：
10.3969/j.issn.1006-2238.2019.1.008
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
刘芬
中科院分区：
文献类型：
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作者：
赵宁;李勇;邵强;杨云;陈家泉;彭巍;胡世林;钱克俭;刘芬
: 目的 观察中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）对脂多糖（LPS）诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的放大作用。 方法 采用小鼠外周血中性粒细胞分离试剂盒分离提取 C57BL/6 小鼠外周血中性粒细胞。 采用佛波酯(PMA)(100nmol/L)诱导中性粒细胞形成 NETs，采用荧光显微镜及扫描电子显微镜观察 NETs。 体外培养大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383，分为⑴对照组：加入等体积 PBS；⑵NETs 组：加入制备好的（1.7×106 个/ml）NETs；⑶LPS 组：加入 1mg/L LPS；⑷LPS+NETs 组：LPS 联合 NETs 共刺激，各组均刺激 12h。 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。 结果 荧光显微镜下观察示对照组中性粒细胞核形态完整， 无 DNA 与 NETs 的胞外共定位网状结构，PMA 刺激组可见DNA 网状结构，且与 NETs 共定位；扫描电子显微镜下也观察到中性粒细胞染色质呈网状结构释放至胞外，提示 PMA 诱导NETs 形成成功。 采用 LPS、NETs 分别刺激肺泡巨噬细胞 12h， 细胞上清液中的 IL-1β、TNF-α 含量均较对照组显著升高，LPS+NETs 组上清液中的 IL-1β 含量较 LPS 组显著升高（P0.05）。 结论 NETs 增加 LPS 诱导的肺泡巨噬细胞炎症因子释放，提示 NETs 可以放大 LPS 诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应