Sequential Activation of Guide RNAs to Enable Successive CRISPR-Cas9 Activities.
Sequential Activation of Guide RNAs to Enable Successive CRISPR-Cas9 Activities.
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DOI：
10.1016/j.molcel.2020.12.003
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发表时间：
2021-01-21
期刊：
影响因子：
16
通讯作者：
Merrill, Bradley J.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Clarke, Ryan;Terry, Alexander R.;Pennington, Hannah;Hasty, Cody;MacDougall, Matthew S.;Regan, Maureen;Merrill, Bradley J.
目前，高度多重的遗传操作可以一次全部递送到哺乳动物细胞，或者基因调控序列的广泛工程化可以用于有条件地激活一些操作。在这里，我们提供了一个新的系统，使多个基因操作被执行作为一个预先编程的级联事件的原理证明。该系统充分利用了S.它是基于化脓性链球菌Cas9，并基于活性的各个模块的灵活安排。基本模块由一个无活性的单向导RNA（sgRNA）样组分组成，该组分通过另一个sgRNA的作用转化为活性状态。模块可以被布置以产生顺序遗传操作的算法程序，而不需要工程化细胞类型特异性启动子或基因调控序列。随着利用spCas9的可用工具的多样性不断扩大，这种基于sgRNA的系统提供了与哺乳动物细胞生物学的多个水平的接口。
Currently, either highly multiplexed genetic manipulations can be delivered to mammalian cells all at once, or extensive engineering of gene regulatory sequences can be used to conditionally activate a few manipulations. Here, we provide proof-of-principle for a new system enabling multiple genetic manipulations to be executed as a preprogrammed cascade of events. The system leverages the programmability of the S. pyogenes Cas9 and is based on flexible arrangements of individual modules of activity. The basic module consists of an inactive single guide RNA (sgRNA) -like component that is converted to an active state through the effects of another sgRNA. Modules can be arranged to bring about an algorithmic program of sequential genetic manipulations without the need for engineering cell type specific promoters or gene regulatory sequences. With the expanding diversity of available tools that utilize spCas9, this sgRNA-based system provides multiple levels of interfacing with mammalian cell biology.
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影响因子：
64.8
作者：
Konermann S;Brigham MD;Trevino AE;Joung J;Abudayyeh OO;Barcena C;Hsu PD;Habib N;Gootenberg JS;Nishimasu H;Nureki O;Zhang F
通讯作者：
Zhang F
影响因子：
64.8
作者：
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通讯作者：
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作者：
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Tjian, Robert
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作者：
Farzadfard, Fahim;Gharaei, Nava;Lu, Timothy K.
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Lu, Timothy K.
影响因子：
56.9
作者：
Jinek, Martin;Chylinski, Krzysztof;Charpentier, Emmanuelle
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