Bovine stomach myosin light chain kinase: purification, characterization, and comparison with the turkey gizzard enzyme.

Bovine stomach myosin light chain kinase: purification, characterization, and comparison with the turkey gizzard enzyme.
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牛胃肌球蛋白轻链激酶:纯化、表征以及与火鸡砂囊酶的比较。

DOI:
10.1021/bi00269a041
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发表时间:
1982
期刊:
影响因子:
2.9
通讯作者:
Hartshorne,DJ
Hartshorne,DJ
中科院分区:
生物学3区
文献类型:
--
作者:
Walsh,MP;Hinkins,S;Flink,IL;Hartshorne,DJ

文献摘要

参考文献

被引文献

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Michael P. Walsh,** Susan Hinkins、Irwin L. Flink 和 David J. Hartshorne* 摘要:通过简单快速的程序从牛瘤胃中纯化肌球蛋白轻链激酶,包括从高浓度 Mg2+ 洗涤的“肌原纤维”中提取、硫酸铵分级分离、Affi-Gel Blue 色谱法和离子交换色谱法。类似的方法成功地从火鸡砂囊中纯化了激酶。牛胃酶表现出许多与火鸡砂囊酶相同的特性:激酶活性依赖于 Ca2+ 和钙调蛋白,钙调蛋白的表观 Kd 为 1.3 X 10” 9 M;牛胃肌球蛋白轻链激酶与固定化钙调蛋白表现出 Ca2+ 依赖性相互作用;牛胃和火鸡砂囊激酶似乎催化 20 上相同位点的磷酸化平滑肌肌球蛋白的 000 道尔顿轻链;牛胃肌球蛋白轻链激酶是 cAMP 依赖性蛋白激酶的底物,其中两个被磷酸化
Michael P. Walsh,** Susan Hinkins, Irwin L. Flink, and David J. Hartshorne* abstract: Myosin light chain kinase has been purified from bovine rumen by a simple and rapid procedure involving ex-traction from washed “myofibrils” with a high Mg2+ concen-tration, ammonium sulfate fractionation, Affi-Gel Blue chromatography, and ion-exchange chromatography. A sim-ilar method was successful in purificationof the kinase from turkey gizzard. The bovine stomach enzyme exhibits many properties in common with the turkey gizzard enzyme: kinase activity is dependent on Ca2+ and calmodulin, with an apparentKd for calmodulin of 1.3 X 10” 9 M; bovine stomach myosin light chain kinase exhibits Ca2+-dependent interaction with immobilized calmodulin; bovine stomach and turkey gizzard kinases appear to catalyzephosphorylation of the same site on the 20 000-dalton light chain of smooth muscle myosin; and bovine stomach myosin light chain kinase is a substrate of the cAMP-dependent protein kinase with phosphorylation of two
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