Advanced tools for the analysis of protein phosphorylation in yeast mitochondria.
Advanced tools for the analysis of protein phosphorylation in yeast mitochondria.
复制标题
用于分析酵母线粒体中蛋白质磷酸化的高级工具
DOI：
10.1016/j.ab.2018.05.022
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发表时间：
2018
影响因子：
2.9
通讯作者：
Schmidt
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Walther;Gonczarowska-Jorge;Sickmann;Zahedi;Meisinger;Schmidt
线粒体中蛋白质磷酸化的生化分析落后于胞质信号事件。原因之一是在线粒体的常见分离过程中许多磷酸化位点的稳定性较差。我们在这里提出了一个优化的，快速的协议，酵母线粒体的纯化，大大提高了磷酸化线粒体蛋白的回收率。此外，我们描述了改进的协议的生化分析线粒体蛋白磷酸化的Zn 2 +-Phos-标签电泳变性和-第一次-原生条件下，并证明他们优于以前应用的方法。
The biochemical analysis of protein phosphorylation in mitochondria lags behind that of cytosolic signaling events. One reason is the poor stability of many phosphorylation sites during common isolation procedures for mitochondria. We present here an optimized, fast protocol for the purification of yeast mitochondria that greatly increases recovery of phosphorylated mitochondrial proteins. Moreover, we describe improved protocols for the biochemical analysis of mitochondrial protein phosphorylation by Zn2+-Phos-tag electrophoresis under both denaturing and - for the first time - native conditions, and demonstrate that they outperform previously applied methods.
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