细胞外信号调节激酶/miR-133b在甲基苯丙胺致PC12细胞神经毒性的作用及机制
细胞外信号调节激酶/miR-133b在甲基苯丙胺致PC12细胞神经毒性的作用及机制
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DOI：
10.3969/j.issn.0529-1356.2014.06.005
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发表时间：
2012-12
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
孙晋浩
中科院分区：
文献类型：
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作者：
刘海莉;朱德晓;吴金涛;岳庆伟;王辉;李泽岩;李贵宝;刘增训;张静;孙晋浩
目的探讨甲基苯丙胺（MA）致神经细胞毒性过程中细胞外信号调节激酶（ERK）和miR-133b的表达变化及调控机制。方法用MA建立PC12神经细胞损伤模型，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞活性及镜下形态观察确定MA最佳损伤浓度；应用流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）水平；通过Western blotting技术测定总ERK1／2和磷酸化ERK1／2（p-ERK1／2）的表达变化；并应用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）测定miR-133b的表达变化。为进一步分析ERK／miR133b分子通路的作用关系，经U0126特异阻断ERK通路，检测miR-133b的表达变化。结果给予不同浓度的MA，均可导致PCI2细胞损伤，其中800μmol／LMA处理后，大部分胞体变圆，神经突起退缩，神经网络消失。MTT结果显示细胞活性明显下降。进-步的细胞毒性机制分析显示，MA处理后，细胞内ROS水平升高，p-ERK表达增高，miR-133b表达降低；并且给予ERK通路抑制剂U0126（10μmol／L）后，miR-133b表达升高，细胞活性增强，胞内ROS水平降低，镜下细胞损伤改善。结论MA可通过上调ERK磷酸化抑制miR-133b表达，介导神经元毒性损伤。