Advancing uracil-excision based cloning towards an ideal technique for cloning PCR fragments.
Advancing uracil-excision based cloning towards an ideal technique for cloning PCR fragments.
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DOI：
10.1093/nar/gkl635
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发表时间：
2006
影响因子：
14.9
通讯作者：
Halkier, Barbara A.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Nour-Eldin, Hussam H.;Hansen, Bjarne G.;Norholm, Morten H. H.;Jensen, Jacob K.;Halkier, Barbara A.
与其他现代克隆技术相比，大量未使用的尿嘧啶切除分子克隆技术在大多数方面都具有优良的特征。然而，由于与校对DNA聚合酶不兼容，它的应用受到了阻碍。我们通过确定PfuCx是一种兼容的校对DNA聚合酶和开发一种改进的载体设计策略来改进这项技术。该技术具有简单、快速、高效、低成本等独有的特点，与高保真和透明、简单、灵活的矢量设计相结合。已经构建了一套全面的载体，涵盖了广泛的不同应用，并确认了它们的功能。
The largely unused uracil-excision molecular cloning technique has excellent features in most aspects compared to other modern cloning techniques. Its application has, however, been hampered by incompatibility with proof-reading DNA polymerases. We have advanced the technique by identifying PfuCx as a compatible proof-reading DNA polymerase and by developing an improved vector design strategy. The original features of the technique, namely simplicity, speed, high efficiency and low cost are thus combined with high fidelity as well as a transparent, simple and flexible vector design. A comprehensive set of vectors has been constructed covering a wide range of different applications and their functionality has been confirmed.
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Nagai, T;Ibata, K;Miyawaki, A
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作者：
Clough, SJ;Bent, AF
通讯作者：
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作者：
Leber, M;Kaderali, L;Schrader, R
通讯作者：
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DOI：
10.1101/gr.2.4.328
发表时间：
1993-05-01
期刊：
PCR methods and applications
影响因子：
--
作者：
Smith, C;Day, P J;Walker, M R
通讯作者：
Walker, M R