miR-155/自噬/外泌体对酒精性肝病的影响
miR-155/自噬/外泌体对酒精性肝病的影响
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DOI：
10.3969/j.issn.1000-4718.2021.05.016
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发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
肖莉
中科院分区：
文献类型：
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作者：
陈思龙;徐光福;覃诗雨;肖莉
目的:研究酒精性肝病(ALD)中酒精持续激活小鼠肝脏巨噬细胞(即Kupffer细胞)并诱发肝脏炎性损伤的机制。方法:使用Gao-binge法制备慢性ALD小鼠模型,观察肝损伤,检测外泌体的浓度和大小分布,Western blot和RT-qPCR检测自噬相关蛋白和微小RNA-155(miR-155)的表达。体外实验中,对小鼠肝细胞系AML-12予以乙醇刺激24 h,制备肝细胞损伤模型,检测相关指标的变化。结果:酒精液体饮食导致小鼠肝细胞空泡变性、肝组织的脂质沉积和炎症细胞浸润,显示ALD疾病动物造模成功。与对照饮食组相比,酒精饮食喂养的小鼠肝脏肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、一氧化氮合酶2(NOS-2)、F4/80和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA表达升高,同时伴随肝细胞外泌体的生成成倍增加,提示慢性酒精摄入诱导的巨噬细胞过度活化与外泌体分泌增多有关。进一步研究表明,酒精饮食小鼠肝脏溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)和LAMP2的表达降低,细胞自噬通量显著受损,肝脏miR-155的表达明显升高。体外实验显示,酒精可直接诱导AML-12细胞miR-155表达,减少LAMP1和LAMP2表达,抑制细胞自噬通量,促进外泌体分泌。同时,乙醇处理组外泌体与pdTHP-1巨噬细胞共孵育后,细胞内TNF-α和IL-1β的mRNA表达显著增加,说明其外泌体可直接激活巨噬细胞。结论:酒精通过刺激肝脏miR-155介导的自噬和外泌体分泌,诱导肝细胞外泌体及其携带的致炎因子释放显著增加,是ALD中肝脏巨噬细胞持续过度激活的重要因素。