NUTS and BOLTS: applications of fluorescence-detected sedimentation.
NUTS and BOLTS: applications of fluorescence-detected sedimentation.
复制标题
DOI：
10.1016/j.ab.2008.11.033
复制
发表时间：
2009-07-01
影响因子：
2.9
通讯作者：
Laue TM
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Kroe RR;Laue TM
分析超速离心是一种广泛使用的表征大分子溶液行为的方法。然而，两种常用的检测器（吸光度和干扰）对可分析溶液的浓度和复杂性施加了一些基本限制。最近为 XL-I 分析超速离心机 (AU-FDS) 添加了荧光检测器，可实现两种不同类型的沉降实验。首先，AU-FDS 可以检测皮摩尔浓度的标记溶质，从而能够表征非常稀的大分子溶液，我们将这种应用称为正常使用示踪剂沉降 (NUTS)。 NUTS 分析的高灵敏度可以表征少量材料和高亲和力相互作用。其次，AU-FDS 可以对含有高浓度未标记分子和复杂混合物的溶液中的痕量标记分子进行表征，我们将这种应用称为生物在线示踪剂沉降 (BOLTS)。 BOLTS 的辨别能力能够在细胞裂解物和血清等生物环境中确定标记大分子的尺寸分布。所提供的示例体现了 NUTS 和 BOLTS 应用程序的功能，以及我们对这些应用程序的观察。
Analytical ultracentrifugation is a widely used method for characterizing the solution behavior of macromolecules. However, the two commonly used detectors (absorbance and interference) impose some fundamental restrictions on the concentrations and complexity of the solutions that can be analyzed. The recent addition of a fluorescence detector for the XL-I analytical ultracentrifuge (AU-FDS) enables two different types of sedimentation experiments. First, the AU-FDS can detect picomolar concentrations of labeled solutes allowing the characterization of very dilute solutions of macromolecules, applications we call Normal Use Tracer Sedimentation (NUTS). The great sensitivity of NUTS analysis allows the characterization of small quantities of materials and high affinity interactions. Second, AU-FDS allows characterization of trace quantities of labeled molecules in solutions containing high concentrations and complex mixtures of unlabeled molecules, applications we call Biological On Line Tracer Sedimentation (BOLTS). The discrimination of BOLTS enables the size distribution of a labeled macromolecule to be determined in biological milieu such as cell lysates and serum. Examples are presented that embody features of both NUTS and BOLTS applications, along with our observations on these applications.
登录
查看更多内容
影响因子：
3.4
作者：
Schuck, P
通讯作者：
Schuck, P
影响因子：
4.8
作者：
Kingsbury, Jonathan S.;Laue, Thomas M.;Connors, Lawreen H.
通讯作者：
Connors, Lawreen H.
影响因子：
56.9
作者：
Pauling, L.;Pressman, D.;Campbell, D. H.
通讯作者：
Campbell, D. H.
影响因子：
2.9
作者：
Philo, John S.
通讯作者：
Philo, John S.
影响因子：
2.9
作者：
ROWE, AJ
通讯作者：
ROWE, AJ