H-NOX from Clostridium botulinum, like H-NOX from Thermoanaerobacter tengcongensis, Binds Oxygen but with a Less Stable Oxyferrous Heme Intermediate.
H-NOX from Clostridium botulinum, like H-NOX from Thermoanaerobacter tengcongensis, Binds Oxygen but with a Less Stable Oxyferrous Heme Intermediate.
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来自肉毒梭菌的H-Nox，例如Themoanaerobacter tengcongensis的H-Nox，结合氧气，但具有较不稳定的氧气血红素中间体。
DOI：
10.1021/acs.biochem.5b00994
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发表时间：
2015-12-08
期刊：
影响因子：
2.9
通讯作者：
Tsai AL
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Wu G;Liu W;Berka V;Tsai AL
先前报道了从专性厌氧菌肉毒梭菌（Clostridium botulinum，Cb H-NOX）分离的血红素一氧化氮/氧结合蛋白以飞摩尔KD结合NO（Nioche，P.等人，Science 2004，306，1550-1553）。另一方面，尽管在腾冲嗜热厌氧杆菌H-NOX（Tt H-NOX）中稳定含氧亚铁络合物的关键残基完全保留，但未观察到含氧亚铁Cb H-NOX（同一研究）。在这项研究中，我们重新测量的动力学/亲和力的Cb H-NOX的CO，NO和O2。简单一步平衡结合的KD（CO）为1.6 × 10−7 M。对于第一个六配位NO复合物，Cb H-NOX的KD（NO）为8.0 × 10−11 M，而之前的飞摩尔KD（NO）实际上是其多步NO结合的表观KD。清晰地观察到含氧亚铁Cb H-NOX，其KD（O2）为5.3 × 10−5 M，明显高于Tt H-NOX的KD（O2）= 4.4 × 10−8 M。Cb H-NOX的气态配体结合为“滑动比例尺规则”假设提供了另一个支持性实例（Tsai，A. L.等Antioxid.氧化还原信号。2012，17，1246-1263），并且Cb H-NOX中氢键供体Tyr 139的存在选择性地增强了其对氧的亲和力。
Heme nitric oxide/oxygen binding protein isolated from the obligate anaerobe Clostridium botulinum (Cb H-NOX) was previously reported to bind NO with a femtomolar KD (Nioche, P. et al. Science 2004, 306, 1550–1553). On the other hand, no oxyferrous Cb H-NOX was observed despite full conservation of the key residues that stabilize the oxyferrous complex in the H-NOX from Thermoanaerobacter tengcongensis (Tt H-NOX) (the same study). In this study, we re-measured the kinetics/affinities of Cb H-NOX for CO, NO, and O2. KD(CO) for the simple one-step equilibrium binding was 1.6 × 10−7 M. The KD(NO) of Cb H-NOX was 8.0 × 10−11 M for the first six-coordinate NO complex, and the previous femtomolar KD(NO) was actually an apparent KD for its multiple-step NO binding. An oxyferrous Cb H-NOX was clearly observed with a KD(O2) of 5.3 × 10−5 M, which is significantly higher than Tt H-NOX’s KD(O2) = 4.4 × 10−8 M. The gaseous ligand binding of Cb H-NOX provides another supportive example for the “sliding scale rule” hypothesis (Tsai, A.-L. et al. Antioxid. Redox Signal. 2012, 17, 1246–1263), and the presence of hydrogen bond donor Tyr139 in Cb H-NOX selectively enhanced its affinity for oxygen.
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van den Akker, Focco
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作者：
Boon, Elizabeth M.;Marletta, Michael A.
通讯作者：
Marletta, Michael A.
DOI：
10.1006/bbrc.1997.7470
发表时间：
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