基于双拖尾重组聚合酶恒温扩增技术的核酸杂交试纸条快速检测驴肉中的马源性成分
基于双拖尾重组聚合酶恒温扩增技术的核酸杂交试纸条快速检测驴肉中的马源性成分
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DOI：
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
柳海宾
中科院分区：
文献类型：
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作者：
陈阳;任星彤;贾世龙;吴凌亚;王继成;柳海宾
摘 摘 要: 目的 建立快速、操作简单、价格相对低廉的重组聚合酶恒温扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)技术结合核酸杂交试纸条快速检测驴肉中马源性成分的可视化检测技术。 方法 将双拖尾重组聚合酶恒温扩增技术与核酸杂交试纸条相结合。针对马线粒体细胞色素 b (cytb)基因设计拖尾 RPA 引物,.这对特殊引物使 RPA 扩增子带有两个单链拖尾序列, 这两个单链拖尾序列可以特异性地被金纳米探针和试纸条上的检测探针识别并捕获, 形成一条肉眼可见的红色条带, 从而对马源性成分进行检测。 结果 该方法整个扩增(15 min)和检测(5 min)过程在 20 min 即可完成, 对马肉的检出限达到 0.010%, 且仅对马肉核酸有特异性扩增, 与其他 8 个物种的核酸均无交叉反应。20 份市售驴肉样品中有 2 份存在马源性成分, 且该方法与 PCR结合凝胶电泳的检测结果具有很好的一致性。 结论 该方法特异性强、灵敏度高, 可实现驴肉中马源性成分的可视化快速检测。