高产磷脂酶D的蜡样芽孢杆菌诱变筛选及发酵条件优化

高产磷脂酶D的蜡样芽孢杆菌诱变筛选及发酵条件优化
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DOI:
10.13543/j.bhxbzr.2023.05.008
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发表时间:
2023
期刊:
北京化工大学学报. 自然科学版
影响因子:
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通讯作者:
邓利
邓利
中科院分区:
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文献类型:
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作者:
王天一;刘欢;王芳;邓利

文献摘要

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蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是一种天然的磷脂酶D(PLD)生产菌株,为了提高PLD产量,以野生型蜡样芽孢杆菌(B. cereus CICC 20551)为出发菌,使用紫外线和硫酸二乙酯对其进行复合诱变,通过建立的PLD活性高效筛选方法,从大量突变样本中筛选得到一株高产PLD的蜡样芽孢杆菌S6-UD46。将该菌株摇瓶发酵48 h,产酶量达到0.52 U/mL,相比原始菌株(0.32 U/mL)提高了62.5%。对诱导产酶条件与培养基成分进行了优化,确定最佳发酵条件为:以20 g/L牛肉膏为氮源, 10 g/L蔗糖为碳源,在600 nm波长下的光密度(OD_(600))达到4左右时加入40 g/L卵磷脂(磷脂酰胆碱含量>90%)对突变菌株S6-UD46进行诱导产酶,在37 ℃、200 r/min下培养48 h,PLD酶活性可达3.22 U/mL,是优化前的6.19倍。