Synthese und Anwendung Metallkomplex-modifizierter Oligonucleotide
Synthese und Anwendung Metallkomplex-modifizierter Oligonucleotide
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金属配合物修饰寡核苷酸的合成及应用
DOI：
10.11588/heidok.00010737
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发表时间：
2010
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
A. Sprödefeld
中科院分区：
文献类型：
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作者：
A. Sprödefeld
本研究的目的是合成双吡啶功能性寡核苷酸，并将其与ZnII-和CuII-复合物进行特异性DNA测序。与靶向DNA杂交可以破坏金属复合物的稳定性，因此通过Zugabe的预分解催化剂可以使韦尔登生长。显色剂或荧光剂底物产生一个Farb-或荧光信号。 双吡啶-金属复合物-功能性寡核苷酸的非重复序列和测序可优化系统的稳定性和动力学稳定性。信号放大最初是通过一个双稳态Kaskade实现的，如果使用一个化学CuII催化剂，则会产生一个酶促Cofaktor激活剂和一个Gang setzt中的酶催化剂。此外，还需要进行DNA-复合物偶联物的合成和催化特性的研究。这种解决方案是固定的氧化还原催化剂，它是一种金属络合物催化剂，可以在一个分子筛上进行。用一种Farbstoff-DNA-Konjugat können z. B。通过对韦尔登的直接氧化作用进行研究。本文报道了双邻菲咯啉配体3-Clip-phen共价寡核苷酸的合成。一个带有荧光标记DNA的杂交体通过3-Clip-phen与一个铜离子结合，也是一个最好的韦尔登连接。复合物是氧化还原的催化剂。B。用于通过Luftsauerstoff氧化Thiolen或通过Wasserstoffperoxid氧化Hydrochinon。
Die vorliegende Arbeit behandelt die Synthese Bisterpyridin-funktionalisierter Oligonucleotide und die Anwendung ihrer ZnII- und CuII-Komplexe als Sonden für den amplifizierten sequenzspezifischen DNA-Nachweis. Durch Hybridisierung mit Target-DNA kommt es zur Destabilisierung des Metallkomplexes, so dass durch Zugabe geeigneter Präkatalysatoren katalytisch aktive Spezies gebildet werden. Der Einsatz chromogener oder fluorogener Substrate erzeugt nachfolgend ein Farb- oder Fluoreszenzsignal. Bisterpyridin-Metallkomplex-funktionalisierte Oligonucleotide unterschiedlicher Länge und Sequenz wurden zur Optimierung des Systems hinsichtlich ihrer thermodynamischen und kinetischen Stabilität charakterisiert. Die Signal¬amplifikation gelang erstmals durch eine zweistufige Kaskade, wobei zunächst ein chemischer CuII-Katalysator gebildet wird, der dann einen enzymatischen Cofaktor aktiviert und so eine Enzymkatalyse in Gang setzt. Weiterhin befasst sich die Arbeit mit der Synthese und Charakterisierung katalytisch aktiver Kupferkomplex-DNA-Konjugate. Diese sollen als immobilisierbare Redoxkatalysatoren die erstmalige Beobachtung einer Metallkomplex-Katalyse auf Einzelmolekülebene ermöglichen. Durch Hybridisierung mit einem Farbstoff-DNA-Konjugat können z. B. Änderungen der Oxidationsstufe des Kupfers direkt über Fluoreszenzfluktuationen des Farbstoffs beobachtet werden. Dazu wurde der Bisphenanthrolin-Ligand 3-Clip-phen kovalent an Oligonucleotide gekoppelt. Ein Hybrid mit Fluorophor-markierter DNA zeigt die Bindung eines CuII Ions durch 3-Clip-phen anhand von Fluoreszenzlöschung an, was auch auf Einzelmolekülebene bestätigt werden konnte. Die Komplexe sind Redox¬katalysatoren z. B. für die Oxidationen von Thiolen durch Luftsauerstoff oder von Hydrochinon durch Wasserstoffperoxid.