硅胶微导管套管缩窄术建立小鼠颈总动脉血管重塑模型
硅胶微导管套管缩窄术建立小鼠颈总动脉血管重塑模型
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DOI：
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发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
吴弘
中科院分区：
文献类型：
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作者：
赵峰;徐强;胡淑婷;郭志福;宋晓伟;吴弘
目的 通过硅胶微导管套管缩窄术建立一种新的小鼠颈总动脉血管重塑模型，分析血管缩窄时间与血.管重塑之间的关系。方法 12 只 C57BL/6 小鼠经异氟烷麻醉后，取颈正中切口，分离左、右侧颈总动脉。左侧颈总.动脉行缩窄术，将长 1 cm、内径 0.3 mm 的硅胶微导管纵向剖开后套入颈总动脉，固定并扎紧；右侧颈总动脉仅行假.手术，不放置硅胶微导管，不进行缩窄术。在术后 2 周和 4 周时分别处死 6 只小鼠，3 只用于组织病理学观察，3 只用.于 RNA 和蛋白提取。取小鼠两侧颈总动脉制作病理切片，采用 H-E 染色观察颈总动脉血管的显微结构，免疫组织化学.染色检测颈总动脉组织中血管平滑肌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）的表达；取两侧颈总动脉 RNA 和蛋白样品，采用.qRT-PCR 检测血管平滑肌表型转化标志分子钙调理蛋白 1（CNN1）、平滑肌肌动蛋白 α2（ACTA2）的表达，蛋白质印.迹法检测细胞增殖相关分子周期蛋白 A2、周期蛋白 D1 和 PCNA 的表达。结果 12 只小鼠左侧颈总动脉套管缩窄手.术均获得成功，套管扎紧后即刻可见血管管腔狭窄但血流未被阻断，术后 2 周和 4 周取材时小鼠均无明显异常表现。.H-E 染色结果显示，术后 2 周时小鼠左侧颈总动脉血管外膜组织明显增生，4 周时小鼠左侧颈总动脉血管中膜和内膜.明显增生。免疫组织化学染色结果显示，术后 2 周和 4 周时小鼠左侧颈总动脉出现大量 PCNA 表达，提示平滑肌细胞.异常增殖。qRT-PCR 检测结果显示，术后 2 周和 4 周时小鼠左侧颈总动脉收缩型平滑肌细胞标志分子 CNN1、ACTA2.的表达水平均降低。蛋白质印迹法检测结果显示，术后 2 周和 4 周时小鼠左侧颈总动脉增加细胞周期蛋白 A2、周期蛋.白 D1 和 PCNA 的表达水平均升高。结论 硅胶微导管套管致小鼠颈总动脉缩窄是一种简单、高效的血管重塑模型。