Standardized generation and differentiation of neural precursor cells from human pluripotent stem cells.
Standardized generation and differentiation of neural precursor cells from human pluripotent stem cells.
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DOI：
10.1007/s12015-012-9357-8
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发表时间：
2013-08
影响因子：
4.8
通讯作者：
Mallon, B. S.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Kozhich, O. A.;Hamilton, R. S.;Mallon, B. S.
多能干细胞的精确、稳健和可扩展的定向分化是关于疾病建模或未来疗法的重要目标。使用AggreWell™400系统，我们已经使用定义的条件将人胚胎和诱导多能干细胞分化为神经元命运标准化。这允许重复实验的再现性，并促进细胞系的直接比较。由于EB形成的起点是单细胞悬浮液，因此该方案适用于多能干细胞培养的标准和新方法。此外，可以在分化之前扩增和冷冻通过FACS分析常规> 95%NCAMpos和Tra-1- 60 neg的神经前体细胞的中间群体，从而为下游实验提供方便的起始点。
Precise, robust and scalable directed differentiation of pluripotent stem cells is an important goal with respect to disease modeling or future therapies. Using the AggreWell™400 system we have standardized the differentiation of human embryonic and induced pluripotent stem cells to a neuronal fate using defined conditions. This allows reproducibility in replicate experiments and facilitates the direct comparison of cell lines. Since the starting point for EB formation is a single cell suspension, this protocol is suitable for standard and novel methods of pluripotent stem cell culture. Moreover, an intermediate population of neural precursor cells, which are routinely >95% NCAMpos and Tra-1–60neg by FACS analysis, may be expanded and frozen prior to differentiation allowing a convenient starting point for downstream experiments.
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