Affinity Labeling of the 1,25-Dihydroxyvitamin D Receptor (*)
Affinity Labeling of the 1,25-Dihydroxyvitamin D Receptor (*)
复制标题
1,25-二羟基维生素 D 受体的亲和标记 (*)
DOI：
--
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发表时间：
1996
影响因子：
4.8
通讯作者：
M. Holick
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
R. Ray;N. Swamy;P. MacDonald;S. Ray;M. Haussler;M. Holick
促钙化激素1α，25-二羟维生素D （1,25(OH)D）的基因组作用涉及一个多步骤过程，该过程是由1,25(OH)D与1α，25-二羟维生素D受体（VDR）的高度特异性结合触发的。为了研究这一关键步骤，我们合成了1α，25-二羟基[26(27)-3H]维生素D-3-脱氧-3-溴乙酸酯（1,25(OH)[3H]D-BE）和1α，25-二羟基维生素D-3- β-[1-14C]溴乙酸酯（1,25(OH)D-[14C]BE），结合位点定向的1,25(OH)D类似物，亲和力标记的表达重组人VDR（含1,25(OH)[3H]D-BE），以及小牛胸腺浆液和大鼠骨肉瘤（ROS 17/2.8）细胞溶胶中天然存在的VDR（含1,25(OH)D-[14C]BE）。在每种情况下，当在非放射性的1α，25(OH)D过量存在的情况下进行孵育时，标记的急剧减少证明了标记的特异性。这些结果强烈表明，1,25(OH)[3H]D-BE和1,25(OH)D-[14C]BE分别共价修饰杆状病毒表达的重组人VDR和自然发生的小牛胸腺VDR和大鼠骨肉瘤VDR中的1,25(OH)D结合位点。
Genomic actions of the calciotropic hormone 1α,25-dihydroxyvitamin D (1,25(OH)D) involves a multistep process that is triggered by the highly specific binding of 1,25(OH)D to 1α,25-dihydroxyvitamin D receptor, VDR. In order to study this key step in the cascade, we synthesized 1α,25-dihydroxy[26(27)-3H]vitamin D-3-deoxy-3β-bromoacetate (1,25(OH)[3H]D-BE) and 1α,25-dihydroxyvitamin D-3β-[1-14C]bromoacetate (1,25(OH)D-[14C]BE), binding-site directed analogs of 1,25(OH)D, and affinity-labeled baculovirus-expressed recombinant human VDR (with 1,25(OH)[3H]D-BE), and naturally occurring VDRs in cytosols from calf thymus homogenate and rat osteosarcoma (ROS 17/2.8) cells (with 1, 25(OH)D-[14C]BE). In each case, specificity of labeling was demonstrated by the drastic reduction in labeling when the incubation was carried out in the presence of an excess of nonradioactive 1α,25(OH)D. These results strongly suggested that 1,25(OH)[3H]D-BE and 1,25(OH)D-[14C]BE covalently modified the 1,25(OH)D-binding sites in baculovirus-expressed recombinant human VDR and naturally occurring calf thymus VDR and rat osteosarcoma VDR, respectively.
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评估 1,25-二羟基维生素 D3 的光不稳定衍生物作为鸡肠细胞质中 1,25-二羟基维生素-D3 受体的光亲和探针。
DOI：
10.1016/0006-291x(85)91007-1
发表时间：
1985
影响因子：
3.1
作者：
Ray,R;Rose,S;Holick,SA;Holick,MF
通讯作者：
Holick,MF
激素特异性蛋白质的亲和标记。
影响因子：
20.3
作者：
Sweet,F;Murdock,GL
通讯作者：
Murdock,GL
对鸡 1,25-二羟基维生素 D3 受体的独特蛋白水解片段进行免疫化学检测。
DOI：
--
发表时间：
1987
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
Allegretto,EA;Pike,JW;Haussler,MR
通讯作者：
Haussler,MR
杆状病毒介导的人类维生素 D 受体的表达。
DOI：
--
发表时间：
1991
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
MacDonald,PN;Haussler,CA;Terpening,CM;Galligan,MA;Reeder,MC;Whitfield,GK;Haussler,MR
通讯作者：
Haussler,MR
人类维生素 D3 受体的功能域调节骨钙素基因表达。
DOI：
10.1210/mend-3-4-635
发表时间：
1989
期刊：
Molecular endocrinology (Baltimore, Md.)
影响因子：
--
作者：
McDonnell,DP;Scott,RA;Kerner,SA;O'Malley,BW;Pike,JW
通讯作者：
Pike,JW