Proteinase-activated receptor 2 (PAR(2)): development of a ligand-binding assay correlating with activation of PAR(2) by PAR(1)- and PAR(2)-derived peptide ligands.
Proteinase-activated receptor 2 (PAR(2)): development of a ligand-binding assay correlating with activation of PAR(2) by PAR(1)- and PAR(2)-derived peptide ligands.
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蛋白酶激活受体 2 (PAR(2))：开发与 PAR(1) 和 PAR(2) 衍生肽配体激活 PAR(2) 相关的配体结合测定。
DOI：
--
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发表时间：
1999
影响因子：
3.5
通讯作者：
M. Hollenberg
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
B. Al‐Ani;M. Saifeddine;A. Kawabata;B. Renaux;S. Mokashi;M. Hollenberg
大鼠蛋白酶激活受体（PAR）（2）表达细胞系的建立（KNRK-rPAR（2））进行构效关系研究（升高的细胞内Ca（2+））的一系列：1）PAR（1）衍生的受体活化配体（PAR（1）-AP）[SFLLR（P5），SFLLR-NH（2）（P5-NH（2）），SFLLRNP（P7），SFLLRNP-NH（2）（P7-NH（2）），和TFLLR-NH（2）（TF-NH（2））]和2）PAR（2）衍生的活化肽（PAR（2）-AP）[SLIGRL-NH（2）（SL-NH（2））、SLIGR-NH（2）（GR-NH（2））和SLIGKV-NH（2）（KV-NH（2））]。将PAR-AP的活性与PAR（2）-AP类似物trans-cinnamoyl-Leu-Ile-Gly-Arg-Leu-Orn-NH（2）tc-NH（2）进行比较，后者作为[（3）H]丙酰基衍生物（[（3）H]丙酰基-tc-NH（2））用于开发PAR（2）的放射性配体结合测定。在Ca（2+）-信号传导测定中PAR-AP的相对效力为tc-NH（2）= SL-NH（2）> KV-NH（2），与P5-NH（2）> GR-NH（2）> P7-NH（2）> P7 > P5 > TF-NH（2）一致。反向序列PAR-AP、LSIGRL-NH（2）（LS-NH（2））、LRGILS-NH（2）（LR-NH（2））、FSLLRY-NH（2）（FSY-NH（2））和FSLLR-NH（2）（FS-NH（2））以及爪蟾PAR（1）-AP TFRIFD-NH（2）无活性。这些肽的相对生物学效力与它们竞争[（3）H]丙酰基-tc-NH（2）（tc-NH（2）= SL-NH（2）> GR-NH（2）与P5-NH（2）> P5一致）与KNRK-rPAR（2）细胞结合的能力雅阁，而无活性肽（FS-NH（2）; LR-NH（2））没有显示出明显的结合竞争。因此，我们的数据验证了用于PAR（2）研究的配体结合试验，并表明PAR（1）-AP激活大鼠PAR（2）的相对生物效力与其激活人PAR（1）的能力平行。PAR-AP的相对受体结合活性，尽管与其相对生物活性大体一致，但指出几种PAR-AP之间内在受体激活活性的差异。我们已经开发的结合试验应证明用于PAR（2）-配体相互作用的进一步研究。
A cloned rat proteinase-activated receptor (PAR)(2)-expressing cell line (KNRK-rPAR(2)) was used to study the structure-activity relationships (elevated intracellular Ca(2+)) for a series of: 1) PAR(1)-derived receptor-activating ligands (PAR(1)-APs) [SFLLR (P5), SFLLR-NH(2) (P5-NH(2)), SFLLRNP (P7), SFLLRNP-NH(2) (P7-NH(2)), and TFLLR-NH(2) (TF-NH(2))] and 2) PAR(2)-derived-activating-peptides (PAR(2)-APs) [SLIGRL-NH(2) (SL-NH(2)), SLIGR-NH(2) (GR-NH(2)), and SLIGKV-NH(2) (KV-NH(2))]. The activities of the PAR-APs were compared with the PAR(2)-AP analog trans-cinnamoyl-Leu-Ile-Gly-Arg-Leu-Orn-NH(2) tc-NH(2)), which as a [(3)H]propionyl derivative ([(3)H]propionyl-tc-NH(2)) was used to develop a radioligand-binding assay for PAR(2). The relative potencies of the PAR-APs in the Ca(2+)-signaling assay were tc-NH(2) = SL-NH(2) > KV-NH(2) congruent with P5-NH(2) > GR-NH(2) > P7-NH(2) > P7 > P5 > TF-NH(2). The reverse sequence PAR-APs, LSIGRL-NH(2) (LS-NH(2)), LRGILS-NH(2) (LR-NH(2)), FSLLRY-NH(2) (FSY-NH(2)), and FSLLR-NH(2) (FS-NH(2)), as well as the Xenopus PAR(1)-AP TFRIFD-NH(2), were inactive. The relative biological potencies of the peptides were in accord with their ability to compete for the binding of [(3)H]propionyl-tc-NH(2) (tc-NH(2) = SL-NH(2) > GR-NH(2) congruent with P5-NH(2) > P5) to KNRK-rPAR(2) cells, whereas inactive peptides (FS-NH(2); LR-NH(2)) showed no appreciable binding competition. Our data therefore validate a ligand-binding assay for the use in studies of PAR(2) and indicate that the relative biological potencies of the PAR(1)-APs for activating rat PAR(2) parallel their ability to activate human PAR(1). The relative receptor-binding activities of the PAR-APs, although in general agreement with their relative biological activities, point to differences in the intrinsic receptor-activating activities between the several PAR-APs. The binding assay we have developed should prove of use for the further study of PAR(2)-ligand interactions.
受体衍生肽激活血小板凝血酶受体的结构-功能关系。
DOI：
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发表时间：
1992
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
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作者：
VassalloJr,RR;Kieber-Emmons,T;Cichowski,K;Brass,LF
通讯作者：
Brass,LF
通过免疫细胞化学流式细胞术技术对眼细胞的 EGF 细胞表面受体进行定量。
影响因子：
4.4
作者：
Lopez,JG;Chew,SJ;Thompson,HW;Malter,JS;Insler,MS;Beuerman,RW
通讯作者：
Beuerman,RW
影响因子：
15.9
作者：
Corvera, CU;Dery, O;Bunnett, NW
通讯作者：
Bunnett, NW