DENV-2感染的 HUVECs与调节性T细胞相互作用对主要炎性细胞因子产生的影响
DENV-2感染的 HUVECs与调节性T细胞相互作用对主要炎性细胞因子产生的影响
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DOI：
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发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
袁静
中科院分区：
文献类型：
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作者：
陈俊豪;左丽;袁静
目的 研究人原代脐静脉内皮细胞 (primaryhumanumbilicalveinendothelialcells，.HUVECs)被 登革病毒2型 (DENV-2)感染后 ，与调节性T细胞 (regulatoryTcells，Treg)共培 养 ，.HUVEC与 Treg细胞相互作用对各自主要炎性细胞因子 的影响 。方 法 用密 度梯度 离心法 从人浓 缩.白细胞分 离外 周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)，磁珠 阴性 分选 Treg细胞 ，流.式细胞术检测 CD4CD25CD127细胞纯度 。HUVECs经 DENV-2感染后 ，用Transwell与 Treg细胞共.培养 ，对照组用鞘氨醇一1一磷酸(sphingosine.1．phosphate，s1P)1型特异性受体激动剂 CYM-5442预处.理24h去除药物后感染病毒 ，并与 Treg细胞共培养 ，rea1．timeRT．PCR分别 检测 HUVECs的 IL．6、IL．8、.TNF．ot和 Treg细胞 的 IL．10、TGF．B的 mRNA转 录水平 ；双抗体夹心 ELISA法检 测培养上 清 中上述 细.胞 因子表达 。结果 感染后 HUVECs中 DENV．2NS1基因转录水平逐渐上升 ，在 24h达 到峰值 (3．03.±0．26，P<O．O1)后 下降。流式 细胞术 检测经 免疫磁 珠 阴性 分选 的 Treg细胞纯 度为 (84．3±0．5)％ 。.DENV．2感染后 HUVECs的 IL-6、IL．8、TNF．otmRNA转 录均有上调 ，感染 后 24hIL-6、IL．8、TNF． 的.mRNA转 录量分别 为 16．64+_2．64、26．80+_5．81和 5．25±0．42，而未 感染组 的转 录水平分 别为 1．70±.0．68、1．68+_0．74、1．45±O．15，与 Treg共 培养后上 述细胞 因子在各 时间点 的转录有所 降低 ，但 仍高 于.未感染 DENV-2的对 照组 。CYM-5442预处理后被感染 的 HUVECsIL-6、IL-8、TNF． 的 mRNA转 录水.平显著下 降；共培养的Treg细 胞所产生的IL一10、TGF—B也下调。 结论 被 DENV-2感 染的原代.HUVECs能增强Treg细胞IL一10与TGF-B的分泌 ，同时Treg细胞产生的抑制性细胞因子能降低被感.染的HUVECs炎性细胞因子的产生。