Protein stabilization utilizing a redefined codon.
Protein stabilization utilizing a redefined codon.
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DOI：
10.1038/srep09762
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发表时间：
2015-05-18
影响因子：
4.6
通讯作者：
Sakamoto K
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Ohtake K;Yamaguchi A;Mukai T;Kashimura H;Hirano N;Haruki M;Kohashi S;Yamagishi K;Murayama K;Tomabechi Y;Itagaki T;Akasaka R;Kawazoe M;Takemoto C;Shirouzu M;Yokoyama S;Sakamoto K
最近的进展从根本上改变了合成氨基酸掺入蛋白质的方式，除了 20 种典型氨基酸之外，还能够实现高效、多位点的掺入。这一发展为解决生物工程基本问题的新方法提供了机会。在本研究中，我们表明，通过在多个选定位点整合庞大的卤代氨基酸可以增强蛋白质的结构稳定性。因此，谷胱甘肽 S-转移酶分别与 7 个选定位点掺入的 3-氯-和 3-溴-1-酪氨酸显着稳定（分别为 5.2 和 5.6kcal/mol）。 X射线晶体学分析表明，大体积的卤素部分填充了分子内的内部空间，并与邻近的残基形成了非规范的稳定相互作用。这种蛋白质稳定的新机制非常简单，适用于多种蛋白质，工业相关偶氮还原酶的快速稳定就证明了这一点。
Recent advances have fundamentally changed the ways in which synthetic amino acids are incorporated into proteins, enabling their efficient and multiple-site incorporation, in addition to the 20 canonical amino acids. This development provides opportunities for fresh approaches toward addressing fundamental problems in bioengineering. In the present study, we showed that the structural stability of proteins can be enhanced by integrating bulky halogenated amino acids at multiple selected sites. Glutathione S-transferase was thus stabilized significantly (by 5.2 and 5.6 kcal/mol) with 3-chloro- and 3-bromo-l-tyrosines, respectively, incorporated at seven selected sites. X-ray crystallographic analyses revealed that the bulky halogen moieties filled internal spaces within the molecules, and formed non-canonical stabilizing interactions with the neighboring residues. This new mechanism for protein stabilization is quite simple and applicable to a wide range of proteins, as demonstrated by the rapid stabilization of the industrially relevant azoreductase.
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影响因子：
2.8
作者：
Ishikawa, Takeshi;Kuwata, Kazuo
通讯作者：
Kuwata, Kazuo
DOI：
10.1107/s0907444904019158
发表时间：
2004-12-01
影响因子：
2.2
作者：
Emsley, P;Cowtan, K
通讯作者：
Cowtan, K
影响因子：
4.8
作者：
Ito, Kosuke;Nakanishi, Masayuki;Tanokura, Masaru
通讯作者：
Tanokura, Masaru
影响因子：
--
作者：
Edwardraja, Selvakumar;Sriram, Sokalingam;Lee, Sun-Gu
通讯作者：
Lee, Sun-Gu
DOI：
10.1107/s0907444909052925
发表时间：
2010-02
期刊：
Acta crystallographica. Section D, Biological crystallography
影响因子：
--
作者：
Adams PD;Afonine PV;Bunkóczi G;Chen VB;Davis IW;Echols N;Headd JJ;Hung LW;Kapral GJ;Grosse-Kunstleve RW;McCoy AJ;Moriarty NW;Oeffner R;Read RJ;Richardson DC;Richardson JS;Terwilliger TC;Zwart PH
通讯作者：
Zwart PH