汉防己甲素衍生物对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用及其机制
汉防己甲素衍生物对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用及其机制
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DOI：
10.3781/j.issn.1000-7431.2016.11.591
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发表时间：
2016-12
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
刘杰麟
中科院分区：
文献类型：
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作者：
吴翱兰;张荣红;黄晏军;郑艺;潘卫东;刘杰麟
目的探讨汉防己甲素衍生物HL-42 和HL-49 对三阴性乳腺癌MDAMB-231 细胞增殖、克隆形成能力以及凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。 方法采用不同浓度的HL-42 和HL-49 分别作用MDA-MB-231 细胞后，应用MTT 法检测细胞的增殖情况；平板克隆形成实验检测对细胞克隆形成的影响；2 和10 μmol/L 的HL-42 和HL-49 分别作用于MDA-MB-231细胞24 h 后，应用FCM 法检测对细胞凋亡的影响；分别采用半定量RTPCR法和蛋白印迹法检测细胞中Bloom 综合征解旋酶（Bloom's syndromehelicase，BLM）、人乳腺癌易感基因1（breast cancer susceptibility gene 1，BRCA1）和同源重组修复的关键酶Rad51 mRNA 及蛋白的表达水平。 结果1.25~10 μmol/L 的HL-42 和HL-49 处理24、48 和72 h 后，MDAMB-231 细胞的增殖受到抑制，呈时间和浓度依赖性（ P 值均＜0.05），HL-42 作用于MDA-MB-231 细胞24、48 和72 h 的半数抑制浓度（half maximal inhibitoryconcentration，IC 50 ）值分别为（8.27±0.27）、（3.92±0.39）和（2.72±0.14）μmol/L；相应的HL-49 的IC 50 值分别为（5.30±0.45）、（3.19±0.32）和（1.64±0.12）μmol/L；而阳性对照顺铂的IC 50 值则为（61.96±3.83）、（29.08±4.11） 和（16.19±2.53）μmol/L。0.2、0.5、1 和5 μmol/L 的HL-42 和HL-49 均可抑制MDA-MB-231 细胞克隆的形成（ P 值均＜0.001）。2 和10 μmol/L 的HL-42和HL-49 均可诱导MDA-MB-231 细胞凋亡，且有浓度依赖性（ P 值均＜0.05）。2 μmol/L 的HL-42 处理24 h 后，MDA-MB-231 细胞中的Rad51 mRNA 及蛋白的表达水平无明显变化（ P 值均> 0.05）；10 μmol/L 的HL-42 处理24 h后，MDA-MB-231 细胞中的Rad51 mRNA 及蛋白的表达水平下调（ P 值均＜0.05）；2 和10 μmol/L 的HL-42 处理24 h 后，MDA-MB-231 细胞中BLM 和BRCA1 mRNA 及蛋白表达水平无明显变化（ P 值均> 0.05）。2 μmol/L 的HL-49 处理24 h 后，MDA-MB-231 细胞中的BRCA1 mRNA及蛋白表达水平无明显变化（ P 值均> 0.05），10 μmol/L 的HL-49 处理24h 后，MDA-MB-231 细胞中的BRCA1 mRNA 及蛋白表达水平下调（ P 值均＜0.01）；2 和10 μmol/L 的HL-49 处理24 h 后，MDA-MB-231 细胞中的BLM、Rad51 mRNA 及蛋白表达水平下调（ P 值均＜0.01）。 结论汉防己甲素衍生物HL-42 和HL-49 可明显抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231 细胞的增殖并诱导其凋亡，作用机制可能是HL-42 和HL-49 部分阻断了细胞内DNA 损伤修复通路。