闭锁连接蛋白-1核酸适配体的筛选与初步应用

闭锁连接蛋白-1核酸适配体的筛选与初步应用
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DOI:
10.15918/j.tbit1001-0645.2022.226
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发表时间:
2023
期刊:
北京理工大学学报
影响因子:
--
通讯作者:
李勇枝
李勇枝
中科院分区:
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文献类型:
--
作者:
李玉娟;张瀚文;刘珊;王佳平;李勇枝

文献摘要

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基于配体指数富集系统进化技术筛选闭锁连接蛋白-1的核酸适配体,最终筛选到15条ZO-1的核酸适配体(APT_(ZO-1)).排除线性结构与相似结构后,采用酶联免疫吸附法表征了9条APT_(ZO-1)与ZO-1亲和力的大小,排序依次为: APT_(ZO-1) 8>APT_(ZO-1) 2>APT_(ZO-1) 7>APT_(ZO-1) 13>APT_(ZO-1) 1>APT_(ZO-1) 5>APT_(ZO-1) 15>APT_(ZO-1) 12>APT_(ZO-1) 4.采用Cy5荧光基团标记APT_(ZO-1) 8(Cy5-APT_(ZO-1) 8),证实了其能对人结直肠腺癌细胞(Caco-2)与人脑微管内皮细胞(hCMEC/D3)的ZO-1进行荧光定位与半定量分析,且与基于ZO-1抗体法的免疫荧光与蛋白印迹实验结果基本相似.本研究首次筛选到了ZO-1的系列核酸适配体,有望为ZO-1的荧光标记与半定量分析提供一种新型的、特异性高的工具分子.