Crystallizing Membrane Proteins in Lipidic Mesophases. A Host Lipid Screen.
Crystallizing Membrane Proteins in Lipidic Mesophases. A Host Lipid Screen.
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DOI：
10.1021/cg101378s
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发表时间：
2011
影响因子：
3.8
通讯作者：
Caffrey, Martin
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Li, Dianfan;Lee, Jean;Caffrey, Martin
迄今为止，使用立方中间相方法进行的大部分晶体发生研究的默认脂质是单油酸甘油酯。然而，没有充分的理由说明为什么这种18碳顺式单不饱和单酰基甘油应该是所有靶膜蛋白的优选脂质。后者来自一系列具有不同性质的生物膜类型，包括疏水厚度，固有曲率，侧压力分布，脂质和蛋白质组成以及成分不对称性。因此，基于产生宿主中间相的脂质的身份筛选结晶性似乎是合理的。为此，必须提供具有不同酰基链特征（如长度和烯键位置）的单酰基甘油。脂质合成和纯化程序是在作者的实验室，以满足这一需要。在目前的研究与外膜糖转运蛋白，OprB，我们证明了效用的主机脂质筛选作为一种手段，产生衍射质量的晶体。宿主脂质筛选很可能被证明是膜蛋白基于中间相结晶的一种普遍有用的策略。
The default lipid for the bulk of the crystallogenesis studies performed to date using the cubic mesophase method is monoolein. There is no good reason however, why this 18-carbon, cis-monounsaturated monoacylglycerol should be the preferred lipid for all target membrane proteins. The latter come from an array of biomembrane types with varying properties that include hydrophobic thickness, intrinsic curvature, lateral pressure profile, lipid and protein makeup, and compositional asymmetry. Thus, it seems reasonable that screening for crystallizability based on the identity of the lipid creating the hosting mesophase would be worthwhile. For this, monoacylglycerols with differing acyl chain characteristics, such as length and olefinic bond position, must be available. A lipid synthesis and purification program is in place in the author's laboratory to serve this need. In the current study with the outer membrane sugar transporter, OprB, we demonstrate the utility of host lipid screening as a means for generating diffraction-quality crystals. Host lipid screening is likely to prove a generally useful strategy for mesophase-based crystallization of membrane proteins.
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