粘类小麦雄性不育系线粒体DNA的AFLP标记及SCAR转化
粘类小麦雄性不育系线粒体DNA的AFLP标记及SCAR转化
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DOI：
10.3969/j.issn.1674-7968.2014.08.005
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发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
马守才
中科院分区：
文献类型：
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作者：
朱启迪;翁群珠;张改生;张姣;巨岚;于永昂;牛娜;王军卫;马守才
为了能在分子水平上有效鉴定具有粘果山羊草(Aegilops kotschyi)、偏凸山羊草(A. ventricosa)、普通小麦变种斯卑尔脱(Triticum spelta)细胞质雄性不育系及其保持系90-110 和8222，提高其在杂交小麦 (Triticum aestivum L.)研究与应用中的定向遗传改良，本研究对其线粒体DNA 进行了扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism, AFLP) 标记和序列特征性片段扩增区域 (sequence characterized amplified region, SCAR)标记。通过AFLP 标记方法，应用64 对引物组合EcoRⅠ-NNN/MseⅠ-NNN 对小麦同核异质雄性不育系和保持系进行扩增，共扩增出682 条带，其中113 条为多态性条带。引物E-AGG/M-CTA组合在粘果山羊草细胞质雄性不育系中扩增出一条大小约300 bp 的特异性条带，对该特异条带进行回收、测序，利用 Primer Premier 5.0软件重新设计SCAR引物，并对这3 种类型同核异质小麦细胞质雄性不育系和保持系进行扩增，其中引物YW1 在3 种细胞质雄性不育系和保持系中都扩增出条带，而引物YW2 仅在粘果山羊草细胞质雄性不育系扩增出一条198 bp 的特异性片段，结果表明，已成功地将AFLP标记转化为操作简便、表现稳定的SCAR标记。此片段与小麦线粒体基因组有很高的同源性(同源性为99%)，为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶基因(GenBank 登录号: EU534409.1)上的序列，该酶是线粒体中氧化磷酸化的入口酶，与小麦细胞质雄性不育密切相关。本研究可以用于粘类小麦细胞质雄性不育系分子标记辅助育种，也为小麦细胞质种性鉴定提供了技术支撑和理论依据。