皮肤角质形成细胞光老化模型的构建及老化机制的初步研究
皮肤角质形成细胞光老化模型的构建及老化机制的初步研究
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DOI：
10.16016/j.1000-5404.201903210
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
陈爱军
中科院分区：
文献类型：
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作者：
刘川;黄欣;王萍;潘芸;曹迪;刘依依;陈爱军
目的建立有效的皮肤光老化HaCaT细胞模型,初步探索可能涉及的老化相关信号转导途径。方法以30 mJ/cm~2中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐照HaCaT细胞,采用CCK-8检测细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色分析各组阳性细胞百分比, qRT-PCR和Western blot检测衰老相关蛋白p53、p21和p16的表达,细胞免疫荧光检测p21蛋白胞内定位。结果30 mJ/cm~2UVB辐照后,HaCaT细胞增殖率均较对照组降低(P<0.01),G2期细胞比例较对照组增加(P<0.05),细胞SA-β-gal染色阳性率明显高于对照组(P<0.01)。qRT-PCR和Western blot检测结果均显示:辐照后,HaCaT细胞中p53、p16表达明显升高,p21表达明显下降(P<0.05,P<0.01)。细胞免疫荧光结果显示:给予30 mJ/cm~2UVB辐照导致p21发生明显的核移位。结论30 mJ/cm~2 UVB辐照可成功构建光老化HaCaT细胞模型,其机制可能是通过增强p21核定位及激活p16通路诱导了细胞衰老的进程。