Multiplex protein detection with DNA readout via mass spectrometry.
Multiplex protein detection with DNA readout via mass spectrometry.
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DOI：
10.1016/j.nbt.2012.11.003
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发表时间：
2013-01-25
影响因子：
5.4
通讯作者：
Cantor, Charles
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Flanigon, James;Kamali-Moghaddam, Masood;Burbulis, Ian;Annink, Carla;Steffen, Martin;Oeth, Paul;Brent, Roger;van den Boom, Dirk;Landegren, Ulf;Cantor, Charles
多重蛋白质定量已受到测定特异性、灵敏度和通量问题的限制。本研究提出了一种新的方法，克服了这些限制，使用抗体-寡核苷酸结合物的免疫聚合酶链反应（免疫PCR）或邻位连接，再加上竞争性PCR和MALDI-TOF质谱。采用这些技术的组合，我们展示了多重检测和定量多达8种蛋白质，跨越广泛的动态范围从飞摩尔浓度，仅使用微升样品体积。
Multiplex protein quantification has been constrained by issues of assay specificity, sensitivity and throughput. This research presents a novel approach that overcomes these limitations using antibody–oligonucleotide conjugates for immuno-polymerase chain reaction (immuno-PCR) or proximity ligation, coupled with competitive PCR and MALDI-TOF mass spectrometry. Employing these combinations of technologies, we demonstrate multiplex detection and quantification of up to eight proteins, spanning wide dynamic ranges from femtomolar concentrations, using only microliter sample volumes.
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作者：
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