Novel mass spectrometric method for phosphorylation quantification using cerium oxide nanoparticles and tandem mass tags.
Novel mass spectrometric method for phosphorylation quantification using cerium oxide nanoparticles and tandem mass tags.
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DOI：
10.1021/ac203248s
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发表时间：
2012-03-06
影响因子：
7.4
通讯作者：
Leary, Julie A.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Jia, Weitao;Andaya, Armann;Leary, Julie A.
蛋白质磷酸化的化学计量比显著影响蛋白质的功能。质谱学中定量技术的发展已经产生了系统地监测各种蛋白质的调节水平的能力。这项研究报告了一种使用氧化铈纳米颗粒和等压串联质量标签(TMT)标记的综合方法来评估蛋白质磷酸化的绝对化学计量。该方案旨在直接测量已知磷酸化位点的去磷酸化水平，从而允许对亚磷酸盐进行量化。用标准多肽和蛋白质胰酶对该方法的准确性和精密度进行了验证。这一新的方法被应用于定量真核细胞起始因子3H(EIF3H)的磷酸化，eIF3H是整个真核蛋白质翻译起始所必需的蛋白质。到目前为止，这是第一份评估eIF3蛋白磷酸化定量的报告。
The stoichiometry of protein phosphorylation significantly impacts protein function. The development of quantitative techniques in mass spectrometry has generated the ability to systematically monitor the regulation levels of various proteins. This study reports an integrated methodology using cerium oxide nanoparticles and isobaric tandem mass tag (TMT) labeling to assess absolute stoichiometries of protein phosphorylation. This protocol was designed to directly measure the dephosphorylation levels for a known phosphorylation site therefore allowing for quantification of phosphosites. Both the accuracy and precision of the method were verified using standard peptides and protein tryptic digests. This novel method was then applied to quantify phosphorylations on eukaryotic initiation factor 3H (eIF3H), a protein integral to overall eukaryotic protein translation initiation. To date, this is the first report of assessment of protein phosphorylation quantification on eIF3.
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DOI：
10.1073/pnas.0409536102
发表时间：
2005-03-15
影响因子：
11.1
作者：
Steen, H;Jebanathirajah, JA;Kirschner, MW
通讯作者：
Kirschner, MW
影响因子：
4.8
作者：
Kirkpatrick, DS;Gerber, SA;Gygi, SP
通讯作者：
Gygi, SP
影响因子：
3.1
作者：
Broberg, Anders
通讯作者：
Broberg, Anders
影响因子：
7.3
作者：
Olsen, Jesper V.;Vermeulen, Michiel;Mann, Matthias
通讯作者：
Mann, Matthias
影响因子：
4.4
作者：
Jin, Lily L.;Tong, Jiefei;Moran, Michael F.
通讯作者：
Moran, Michael F.