稳定过表达CXCR2受体的HEK-293细胞株的构建以及活性鉴定
稳定过表达CXCR2受体的HEK-293细胞株的构建以及活性鉴定
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DOI：
10.11844/cjcb.2020.08.0003
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发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
杨晓明
中科院分区：
文献类型：
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作者：
张洁;任广明;马文兵;葛志强;詹轶群;尹荣华;杨晓明
CXC趋化因子受体2(the CXC chemokine receptor 2, CXCR2)介导的中性粒细胞趋化在细菌感染、慢性炎症、肿瘤发生发展过程中发挥着至关重要的作用,但是目前对于CXCR2受体及下游信号的调控并未被完全揭示。该研究首先以Flag-CXCR2-Tango质粒为模板设计Flag-CXCR2的特异性引物, PCR扩增后将其连接至pCDH-MCS-T2A-Neo-MSCV慢病毒表达载体上,随后对阳性克隆进行测序及表达验证。接着在HEK-293T细胞中包装过表达Flag-CXCR2的慢病毒颗粒并感染HEK-293细胞,使用遗传霉素筛选后,蛋白质免疫印迹和免疫荧光检测发现, Flag-CXCR2稳定表达在HEK-293细胞膜上。最后利用白细胞介素-8(interleukin-8, IL-8)刺激过表达Flag-CXCR2的细胞株,检测发现CXCR2下游信号通路活化及F-actin组装。