Quantitative assays to measure the transport activity of the mitochondrial calcium uniporter in cell lines or Xenopus oocytes.
Quantitative assays to measure the transport activity of the mitochondrial calcium uniporter in cell lines or Xenopus oocytes.
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DOI：
10.1016/j.xpro.2021.100979
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发表时间：
2021-12-17
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Tsai MF
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Rodriguez MX;Van Keuren AM;Tsai MF
线粒体钙单向转运蛋白介导线粒体Ca 2+摄取，调节关键的细胞功能，包括细胞内Ca 2+信号传导、细胞命运决定和线粒体生物能量学。在这里，我们描述了两个互补的策略来量化的uniporter的运输活动。首先，我们详细介绍了在培养的细胞系中的线粒体Ca 2+放射性核素摄取测定。第二，我们描述了在非洲爪蟾卵母细胞中表达的单向转运蛋白的电生理记录。这些方法使得能够对单向转运蛋白进行详细的动力学分析，以将其分子特性与生理功能联系起来。有关本方案使用和执行的完整详细信息，请参见和。两种定量分析线粒体钙摄取的方法使用钙-45放射性同位素测量细胞系中的线粒体钙摄取非洲爪蟾卵母细胞中线粒体钙单向转运体的电记录介导线粒体Ca 2+摄取的线粒体钙单向转运体调节关键的细胞功能，包括细胞内Ca 2+信号传导、细胞命运决定和线粒体生物能量学。在这里，我们描述了两个互补的策略来量化的uniporter的运输活动。首先，我们详细介绍了在培养的细胞系中的线粒体Ca 2+放射性核素摄取测定。第二，我们描述了在非洲爪蟾卵母细胞中表达的单向转运蛋白的电生理记录。这些方法使得能够对单向转运蛋白进行详细的动力学分析，以将其分子特性与生理功能联系起来。
The mitochondrial calcium uniporter, which mediates mitochondrial Ca2+ uptake, regulates key cellular functions, including intracellular Ca2+ signaling, cell-fate determination, and mitochondrial bioenergetics. Here, we describe two complementary strategies to quantify the uniporter’s transport activity. First, we detail a mitochondrial Ca2+ radionuclide uptake assay in cultured cell lines. Second, we describe electrophysiological recordings of the uniporter expressed in Xenopus oocytes. These approaches enable a detailed kinetic analysis of the uniporter to link its molecular properties to physiological functions. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to and. Two quantitative approaches to analyze mitochondrial calcium uptake Measuring mitochondrial calcium uptake in cell lines using calcium-45 radioisotope Electrical recordings of the mitochondrial calcium uniporter in Xenopus oocytes The mitochondrial calcium uniporter, which mediates mitochondrial Ca2+ uptake, regulates key cellular functions, including intracellular Ca2+ signaling, cell-fate determination, and mitochondrial bioenergetics. Here, we describe two complementary strategies to quantify the uniporter’s transport activity. First, we detail a mitochondrial Ca2+ radionuclide uptake assay in cultured cell lines. Second, we describe electrophysiological recordings of the uniporter expressed in Xenopus oocytes. These approaches enable a detailed kinetic analysis of the uniporter to link its molecular properties to physiological functions.
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影响因子：
7.7
作者：
Phillips, Charles B.;Tsai, Chen-Wei;Tsai, Ming-Feng
通讯作者：
Tsai, Ming-Feng
DOI：
10.1126/science.1242993
发表时间：
2013-12-13
期刊：
Science (New York, N.Y.)
影响因子：
--
作者：
Sancak Y;Markhard AL;Kitami T;Kovács-Bogdán E;Kamer KJ;Udeshi ND;Carr SA;Chaudhuri D;Clapham DE;Li AA;Calvo SE;Goldberger O;Mootha VK
通讯作者：
Mootha VK
影响因子：
8.8
作者：
Van Keuren AM;Tsai CW;Balderas E;Rodriguez MX;Chaudhuri D;Tsai MF
通讯作者：
Tsai MF
DOI：
10.1007/978-1-4939-9018-4_7
发表时间：
2019-01-01
期刊：
CALCIUM SIGNALLING: METHODS AND PROTOCOLS
影响因子：
--
作者：
Garg, Vivek;Kirichok, Yuriy Y.
通讯作者：
Kirichok, Yuriy Y.
影响因子：
--
作者：
Rio, Donald C
通讯作者：
Rio, Donald C