Continuous fluorescence-based measurement of redox-driven sodium ion translocation.

Continuous fluorescence-based measurement of redox-driven sodium ion translocation.
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基于连续荧光的氧化还原驱动钠离子易位测量

DOI:
10.1016/j.ab.2014.05.012
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发表时间:
2014
影响因子:
2.9
通讯作者:
Steuber
Steuber
中科院分区:
生物学4区
文献类型:
--
作者:
Claussen;Karuppasamy;Schaffitzel;Steuber

文献摘要

参考文献

被引文献

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研究钠离子泵酶的作用机制需要在体外追踪纯化蛋白和重组蛋白对钠离子的转运。在这里,我们描述了一个协议,允许以下的Na+积累的蛋白脂质体的Na+易位NADH:醌氧化还原酶(Na+-NQR)从霍乱弧菌使用钠敏感的荧光体钠绿色。在存在其底物NADH的再生系统的情况下,Na+-NQR在蛋白脂质体中积累Na+,其作为荧光变化可见。
Investigation of the mechanism of sodium ion pumping enzymes requires methods to follow the translocation of sodium ions by the purified and reconstituted proteinsin vitro. Here, we describe a protocol that allows following the accumulation of Na+in proteoliposomes by the Na+-translocating NADH:quinone oxidoreductase (Na+-NQR) fromVibrio choleraeusing the sodium-sensitive fluorophor sodium green. In the presence of a regenerative system for its substrate NADH, the Na+-NQR accumulates Na+in the proteoliposomes which is visible as a change in fluorescence.
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通讯作者: Moeller, Heiko M.