TRIM9 基因调控牛支原体脂质相关膜蛋白诱导 EBL细胞 IL-1β表达的研究.

TRIM9 基因调控牛支原体脂质相关膜蛋白诱导 EBL细胞 IL-1β表达的研究.
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DOI:
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发表时间:
2020
期刊:
中国预防兽医学报
影响因子:
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通讯作者:
辛九庆
辛九庆
中科院分区:
其他
文献类型:
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作者:
赵雅芝;潘巧;王显兵;郝文君;刘桐;王秀梅;辛九庆

文献摘要

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为进一步探究宿主抵御牛支原体(Mycoplasma bovis, M. bovis)脂质相关膜蛋白(LAMPs)侵害的天然免疫应答机制,开展.了胎牛肺(EBL)细胞 TRIM9 基因与 IL-1β 释放机制关系的研究。本研究通过荧光定量 PCR(qPCR)方法验证了牛支原体 LAMPs 刺.激 EBL 细胞后可以引起细胞中 TRIM9 基因上调表达。然后利用构建的 pEGFP-C1-TRIM9 荧光报告质粒证明 TRIM9 蛋白能够瞬时表达.于 EBL 细胞浆中。通过将构建的 pCMV-C-HA-TRIM9 重组质粒和 si-TRIM9 干扰质粒转染 EBL 细胞,经 2 μg/mL 牛支原体 LAMPs 刺.激 12 h 后,qPCR 和 ELISA 分别检测 TRIM9 基因和其表达产物。结果显示,过表达 TRIM9 组中 IL-1β 在转录水平和蛋白表达水平上分.别上调 4.1 倍和 4 倍,敲低 TRIM9 组中 IL-1β 分别上调 33 倍和 30 倍。此外 Western blot 检测进一步表明,TRIM9 蛋白过表达组牛支原.体 LAMPs 不诱导 NF-κB 信号通路激活;而敲低 TRIM9 组,牛支原体 LAMPs 能够促进 P65 磷酸化水平提高从而激活 NF-κB 信号通路。.上述结果表明 TRIM9 基因能够抑制 LAMPs 通过 NF-κB 信号通路正向调控 EBL 细胞表达 IL-1β,推测 TRIM9 基因是 EBL 细胞的一种.防御基因。