肠道病毒71型对人神经胶质瘤U251细胞线粒体动力学的影响
肠道病毒71型对人神经胶质瘤U251细胞线粒体动力学的影响
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DOI：
10.12182/20200360201
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发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
王欢
中科院分区：
文献类型：
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作者：
张琬棂;刘正芸;王盛羽;罗果;易海波;宋鸿;王欢
目的探讨肠道病毒71型(EV71)对人神经胶质瘤U251细胞线粒体动力学的影响。方法采用非洲绿猴肾细胞Vero对EV71进行增殖,用Reed-Muench公式计算病毒液的50%细胞感染剂量(50% tissue culture infective dose,TCID_(50));将EV71接种于U251细胞,光学显微镜下观察细胞形态,激光共聚焦显微镜下观察线粒体形态,透射电镜观察线粒体超微结构的改变;Western blot检测线粒体分裂蛋白Drp1、p-Drp1(S637)和融合蛋白Opa1的表达水平;ATP试剂盒检测线粒体ATP水平;MitoSOX染色检测线粒体超氧化物水平。结果EV71的TCID_(50)为10~(-5.4)/ 0.1 mL; EV71感染U251细胞24 h、48 h后细胞明显出现皱缩、变圆或死亡。激光共聚焦显微镜和透射电镜结果显示,EV71感染后细胞线粒体明显延长,线粒体嵴模糊不清;Western bolt结果显示,EV71感染U251细胞24 h和48 h后,Drp1、Opa1表达降低,而p-Drp1(S637)在48 h表达升高,且差异有统计学意义(P<0.05)。EV71感染48 h后,与未感染EV71的U251细胞相比,线粒体ATP生成减少,线粒体超氧化物水平升高(P<0.05)。结论EV71感染U251细胞后,能引起线粒体形态及动力学改变,进而导致线粒体功能的变化,这可能是其引起神经系统功能紊乱的机制之一。