EPI64 regulates microvillar subdomains and structure.
EPI64 regulates microvillar subdomains and structure.
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DOI：
10.1083/jcb.200604046
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发表时间：
2006-12-04
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Bretscher A
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Hanono A;Garbett D;Reczek D;Chambers DN;Bretscher A
EPI 64是一种含有TBC结构域的蛋白，其结合EBP 50的PDZ结构域，EBP 50结合ezrin，微绒毛的主要肌动蛋白结合蛋白。高分辨率光学显微镜显示，ezrin和EBP 50专门定位于微绒毛的膜包围区域，而EPI 64定位于结构中的可变区。过表达EPI 64导致其和EBP 50重新定位于微绒毛的基部，包括缺乏ezrin或质膜的肌动蛋白小根。解偶联EPI 64与EBP 50的结合，表达任何错误定位其TBC结构域的构建体，或敲低EBP 50导致微绒毛的损失。EPI 64的TBC结构域直接结合Arf 6-GTP。过表达TBC结构域增加Arf 6-GTP水平，并且表达显性活性Arf 6导致微绒毛损失。这些数据表明微绒毛具有不同的细胞骨架亚结构域，并且EPI 64调节微绒毛结构。
EPI64 is a TBC domain–containing protein that binds the PDZ domains of EBP50, which binds ezrin, a major actin-binding protein of microvilli. High-resolution light microscopy revealed that ezrin and EBP50 localize exclusively to the membrane-surrounded region of microvilli, whereas EPI64 localizes to variable regions in the structures. Overexpressing EPI64 results in its and EBP50's relocalization to the base of microvilli, including to the actin rootlet devoid of ezrin or plasma membrane. Uncoupling EPI64's binding to EBP50, expression of any construct mislocalizing its TBC domain, or knock down of EBP50 results in loss of microvilli. The TBC domain of EPI64 binds directly to Arf6-GTP. Overexpressing the TBC domain increases Arf6-GTP levels, and expressing dominant-active Arf6 results in microvillar loss. These data reveal that microvilli have distinct cytoskeletal subdomains and that EPI64 regulates microvillar structure.
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