神经纤毛蛋白⁃1 的干扰 RNA 通过诱导结直肠癌细胞 p27 核转位影响细胞自噬与凋亡水平的研究
神经纤毛蛋白⁃1 的干扰 RNA 通过诱导结直肠癌细胞 p27 核转位影响细胞自噬与凋亡水平的研究
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DOI：
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发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
黄秀萍
中科院分区：
文献类型：
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作者：
赖依虹;滕斓;林壁涛;黄秀萍
目的 探究 ＲＮＡ 干扰神经纤毛蛋白⁃１（ｎｅｕｒｏｐｉｌｉｎ⁃１，ＮＲＰ⁃１）对结直肠癌（ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ，ＣＲＣ）细胞自噬与凋亡的影响及.其机制。 方法 将人结直肠癌细胞系 ＤＬＤ⁃１ 随机分为对照组、ｓｈ⁃ＮＣ 组、ｓｈ⁃ＮＲＰ⁃１ 组，进行慢病毒感染后收集各组细胞，实时荧光.定量 ＰＣＲ 和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 测定细胞的感染效果，ＣＣＫ⁃８ 法检测细胞增殖活性，免疫荧光染色观察细胞内 ｐ２７ 蛋白的亚细胞定位，.Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 检测细胞质与细胞核内 ｐ２７ 蛋白表达变化，透射电子显微镜观察细胞自噬情况，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 检测细胞自噬相关.蛋白表达水平，流式细胞术检测细胞凋亡水平。 结果 感染 ｓｈ⁃ＮＲＰ⁃１ 慢病毒液的细胞中 ＮＲＰ⁃１ ｍＲＮＡ 相对表达量与蛋白相对表达量.均显著降低（Ｐ＜０． ０５）；与对照组和 ｓｈ⁃ＮＣ 组比较，ｓｈ⁃ＮＲＰ⁃１ 组细胞增殖活性显著下降，细胞核内 ｐ２７ 荧光染色明显增强，细胞质内 ｐ２７ 蛋.白相对表达量显著下调，而细胞核内 ｐ２７ 蛋白相对表达量显著上调，可见较多双层膜的自噬小体，ＬＣ３⁃Ⅱ／ ＬＣ３⁃Ⅰ比值显著升高，Ｂｅｃｌｉｎ⁃１ 蛋白.表达显著上调而 ｐ６２ 蛋白表达显著下调，同时，细胞凋亡率显著增加，差异均有统计学意义（Ｐ＜０． ０５）。 结论 ＲＮＡ 干扰 ＮＲＰ⁃１ 能够抑制.ＣＲＣ 细胞增殖活性，促进细胞自噬与凋亡，该作用可能与其调控 ｐ２７ 蛋白的亚细胞定位有关。