不同来源猪滋养层细胞基因表达的比较
不同来源猪滋养层细胞基因表达的比较
滋养层(trophoblast, TR)在胚胎植入和胎盘发育中有重要作用,TR细胞分化和谱系形成的分子.机制是研究胎盘发育的重要基础。为了比较体外获得的TR细胞与猪(Sus scrofa)体内TR细胞是否具有.差异,从猪怀孕子宫中取得胎盘组织,并同时分离胎盘组织细胞进行体外培养,利用qRT-PCR检测胎盘.组织及其细胞以及猪的体外受精(in vitro fertilization, IVF)囊胚来源TR(IVF-TR)细胞相关基因表达水.平,并对其进行比较。免疫荧光染色结果显示,猪IVF-TR 细胞具有典型的滋养层细胞特点,呈上皮样.形态,表达角蛋白18(keratin 18, KRT18)、角蛋白7(keratin 7, KRT7)和胚胎阶段特异性抗原(stage specific.embryonic antigen 1, SSEA1)等滋养层细胞的标志因子。形态观察结果显示,猪的胎盘为弥散的上皮绒.毛膜胎盘,胎盘母体一侧有许多凸起与子宫壁贴附,较易剥离获得;由猪胎儿胎盘组织分离的细胞,为.细长的梭形和上皮样形态,生长缓慢,最多可传2 代。qRT-PCR 检测显示,不同来源的TR细胞,基因的.表达存在差异,在胎盘组织中的尾型同源盒转录因子2(caudal homeobox transcription factor 2, CDX2)、.妊娠相关糖蛋白(pregnancy-associated glycoprotein, PAG)和GATA 结合蛋白3(GATA binding protein 3,.GATA3)的表达量要显著高于IVF-TR 细胞(P<0.05),而心脏和神经嵴衍生物1(heart and neural crest.derivatives expressed 1, HAND1)和钙粘蛋白3(cadherin 3, CDH3)基因要显著低于IVF-TR 细胞(P<0.05);.从胎盘分离培养的细胞,除TEA域家族成员4(TEA domain family member 4, TEAD4)的表达显著高于胎.盘组织和IVF-TR(P<0.05),其余基因的表达水平多比这二者低。结果提示,IVF-TR细胞更接近分化早.期的TR 细胞,基因表达不同于其胎盘组织中处于分化晚期的成熟TR 细胞,而体外分离的胎盘组织细.胞与体内组织之间也存在基因表达的差异。结果说明IVF-TR细胞可能作为研究猪TR分化的材料,为.猪胎盘发育和分化的研究提供一个可用的工具。本研究为初步评估猪IVF-TR 细胞能否用于猪胎盘.TR发育和分化研究提供了参考资料。