强精片调控 Toll 样受体信号通路影响 Sertoli 细胞生精微环境的机制研究
强精片调控 Toll 样受体信号通路影响 Sertoli 细胞生精微环境的机制研究
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期刊：
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通讯作者：
常德贵
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文献类型：
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作者：
尤耀东;张玲;俞旭君;李广森;黄晓朋;常德贵
目的 观察强精片对Sertoli细胞Toll样受体信号通路（TLR4/MyD88/TRAF6/NF-κB通路）的影响，探讨强精片对睾丸支持细胞炎性微环境的影响机制。方法 分别采用强精片含药血清和TLR4抑制剂TAK242干预UU感染细胞模型，以空白组和感染模型组作为对照。采用RT-qPCR和Western blotting分别检测TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κB的基因和蛋白表达水平，免疫荧光技术检测NF-κB的核转位情况，探索强精片含药血清对TLR信号通路的作用靶点，揭示其作用模式和作用规律。结果 强精片含药血清可抑制TLR4 mRNA、TRAF6 mRNA的表达（P＜0.05），导致TLR4蛋白含量的降低（P＜0.05），且作用优于TLR4抑制剂（P＜0.05）；但抑制TRAF6 mRNA的表达作用不及TAK242（P＞0.05），但其可降低TRAF6蛋白的含量（P＜0.05），作用强度与TAK242相当（P＜0.05）。强精片含药血清对MyD88 mRNA、NF-κB mRNA的表达无明显影响（P＞0.05），对NF-κB总蛋白的含量亦无明显影响（P＞0.05），但可减少MyD88蛋白的含量（P＜0.05）。但可抑制NF-κB的磷酸化水平（P＜0.05），作用强度优于TAK242（P＜0.05）。同时免疫荧光检测显示，强精片含药血清可明显抑制NF-κB的核转位。结论 强精片可抑制TLR4、TRAF6基因的表达，减少TLR4、MyD88和TRAF6蛋白的含量，抑制NF-κB的磷酸化和核转位，其对TLR4/MyD88/TRAF6/NF-κB信号通路的干预方式存在多样性。