TGEV 和PEDV 融合S 蛋白在乳酸乳球菌食品级细胞壁锚定高效诱导表达与免疫原性分析

TGEV 和PEDV 融合S 蛋白在乳酸乳球菌食品级细胞壁锚定高效诱导表达与免疫原性分析
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DOI:
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发表时间:
2015
期刊:
中 国 食 品 学 报
影响因子:
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通讯作者:
郭晓燕
郭晓燕
中科院分区:
其他
文献类型:
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作者:
徐波;熊维娜;李烨青;周通;刘志文;应碧;郭晓燕

文献摘要

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近年来猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻在我国广泛流行,给养殖业带来了巨大的经济损失。 目前对此两种疾病的防治手段还停留在使用常规疫苗。 现有的疫苗免疫效果不够理想, 急需寻求一种安全高效的防治手段。 本文首先构建了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)融合 S 基因,以乳酸乳球菌食品级细胞壁锚定高效诱导表达载体 pRNV48 为基础, 构建了 TGEV 和 PEDV 融合 S 基因的表达质粒 pRNV48-TPs。将得到的重组质粒用电穿孔方法转入乳酸乳球菌 NZ9000 感受态细胞中,获得了重组菌乳酸乳球菌 Z9000/ pRNV48-TPs。 再利用 nisin 对重组菌进行诱导,提取细胞壁蛋白后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析目的蛋白的表达情况,然后分别对兔子进行注射免疫和口服免疫,并用 Western Blot 分析。 通过乳酸乳球菌食品级细胞壁锚定高效诱导表达载体,诱导表达 TGEV 与 PEDV 融合 S 蛋白产生中和抗体,以期探讨口服疫苗的免疫反应机理,为由 TGEV 与 PEDV 研发的安全、高效的疫苗奠定良好的基础。