Reconstitution of active human core Mediator complex reveals a critical role of the MED14 subunit.
Reconstitution of active human core Mediator complex reveals a critical role of the MED14 subunit.
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DOI：
10.1038/nsmb.2914
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发表时间：
2014-12
影响因子：
16.8
通讯作者：
Roeder RG
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Cevher MA;Shi Y;Li D;Chait BT;Malik S;Roeder RG
进化上保守的介体复合物是RNA聚合酶II（Pol II）介导的转录的关键共激活因子。在这里，我们报告了功能性15亚基人类核心介体复合物的重建及其功能测定和化学交联耦合质谱（CX-MS）的表征。尽管重组的头部和中间模块可以稳定地结合，但只有将MED 14掺入到双模块复合物中，它才获得基础和辅激活因子功能。这是由于含有MED 14的复合物与Pol II缔合的能力显著增强。总之，我们的分析确定MED 14作为一个架构和功能骨干的调解复杂。我们进一步建立了一个有条件的要求后生动物特异性MED 26，成为明显的异源核因子的存在下。这种通用方法为系统地剖析与中介复合体相关的多层功能铺平了道路。
The evolutionarily conserved Mediator complex is a critical coactivator for RNA polymerase II (Pol II)-mediated transcription. Here, we report the reconstitution of a functional 15-subunit human core Mediator complex and its characterization by functional assays and chemical cross-linking coupled to mass spectrometry (CX-MS). Whereas the reconstituted head and middle modules can stably associate, only with incorporation of MED14 into the bi-modular complex does it acquire basal and coactivator functions. This results from a dramatically enhanced ability of MED14-containing complexes to associate with Pol II. Altogether, our analyses identify MED14 as both an architectural and a functional backbone of the Mediator complex. We further establish a conditional requirement for metazoan-specific MED26 that becomes evident in the presence of heterologous nuclear factors. This general approach paves the way for systematically dissecting the multiple layers of functionalities associated with the Mediator complex.
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影响因子：
5.3
作者：
Baek, HJ;Malik, S;Roeder, RG
通讯作者：
Roeder, RG
影响因子：
3.6
作者：
Lemaire, M;Xie, J;Collart, MA
通讯作者：
Collart, MA
影响因子：
5.7
作者：
Cai, Gang;Chaban, Yuriy L.;Imasaki, Tsuyoshi;Kovacs, Julio A.;Calero, Guillermo;Penczek, Pawel A.;Takagi, Yuichiro;Asturias, Francisco J.
通讯作者：
Asturias, Francisco J.
影响因子：
64.8
作者：
通讯作者：
--
影响因子：
4.8
作者：
Baek, Hwa Jin;Kang, Yun Kyoung;Roeder, Robert G.
通讯作者：
Roeder, Robert G.