异体滑膜及青少年软骨颗粒移植修复兔半月板"白区"缺损及移植细胞的转归研究
异体滑膜及青少年软骨颗粒移植修复兔半月板"白区"缺损及移植细胞的转归研究
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DOI：
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
敖英芳
中科院分区：
文献类型：
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作者：
闫文强;吴桐;樊逸菲;麦合木提·麦麦提敏;赵逢源;李豫皖;曹宸喜;胡晓青;程锦;敖英芳
目的:探讨异体滑膜和青少年软骨颗粒移植在半月板"白区"缺损修复上的协同作用;研究移植细胞的转归(存活和分化);研究滑膜间充质干细胞和软骨细胞间的相互作用。方法:选取2只未成年雄性兔作为滑膜及青少年软骨颗粒供体。选取24只成年雌性兔(共48个膝关节)制备半月板缺损模型,分为以下几组:空白组,半月板缺损无任何处理;单纯纤维蛋白胶组,在半月板缺损处填充单纯纤维蛋白胶;纤维蛋白胶+滑膜移植组,纤维蛋白胶包裹异体滑膜碎片填充到半月板缺损处;纤维蛋白胶+滑膜+异体青少年软骨颗粒移植组,纤维蛋白胶包裹异体滑膜和异体青少年软骨颗粒填充到半月板缺损处,每组样本量为12个膝关节。分别在术后8周和16周取材,通过组织学和免疫组织化学染色评估半月板缺损修复程度,针对雄性个体特有的Y染色体性别决定区基因(SRY)进行核酸原位杂交,并结合免疫荧光共定位评估移植细胞的存活和分化。其次,建立体外兔滑膜间充质干细胞和软骨细胞共培养系统,检测半月板纤维软骨细胞相关基因转录水平,并探索细胞间相互作用的可能机制。结果:在术后8、16周,相较于空白组、单纯纤维蛋白胶组及纤维蛋白胶+滑膜移植组,纤维蛋白胶+滑膜+异体青少年软骨颗粒移植组的缺损表现出良好的结构完整性、表面光滑度和边缘整合度,修复组织中可见较多的半月板样纤维软骨细胞,并且,细胞周围的基质在甲苯胺蓝和II型胶原免疫组织化学染色中表现为强阳性。在术后16周,纤维蛋白胶+滑膜移植组及纤维蛋白胶+滑膜+异体青少年软骨颗粒移植组的SRY核酸原位杂交信号表现为强阳性,表明移植细胞在受体中至少可存活16周。其次,核酸原位杂交和SOX9免疫荧光共定位显示表面移植滑膜组织中的细胞表现为SOX9阳性,表明移植滑膜组织中的细胞可分化为半月板纤维软骨细胞。滑膜间充质干细胞和软骨细胞共培养后半月板基质相关基因的转录水平与半月板纤维软骨细胞相似,并且,滑膜间充质干细胞和软骨细胞之间可通过细胞外囊泡相互作用。结论:异体滑膜和青少年软骨颗粒移植可协同促进半月板"白区"缺损修复;移植细胞在受体中至少可存活16周;移植滑膜组织中的细胞在半月板缺损处可分化为半月板纤维软骨细胞。