CCRl基因过表达对骨髓问充质干细胞 靶向肝癌迁移能力的影响
CCRl基因过表达对骨髓问充质干细胞 靶向肝癌迁移能力的影响
复制标题
DOI：
--
复制
发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
高云
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
高云
目的研究过表达人的CCRl(hCcRl)受体对人的骨髓间充质干细胞(hMscs)靶.向肝癌迁移能力的影响，探讨Mscs作为细胞载体在肝癌基因治疗中的应用前景。方法构建慢病.毒表达质粒pLv-hCCRl，经293T细胞包装，收集病毒上清液，感染hMSCs。收集各组细胞，通.过RT_PCR、WeStem blot分析各组细胞hCCRl mRNA及蛋白表达情况，并通过TransweU迁.移实验研究hCCRl过表达对hMSCs体外迁移能力的影响。建立肝癌裸鼠原位模型，将荷瘤裸鼠.随机分为2组，每组8只；通过尾静脉注射将hMSCs输入到荷瘤裸鼠体内，研究hCCRl过表达对.hMSCs体内靶向肝癌迁移能力的影响。两组数据之间的比较采用独立样本f检验，多组间均数比较.采用单因素方差分析。结果限制性内切酶酶切及测序表明，成功构建hCCRl慢病毒表达载体。.以293T包装的重组慢病毒能够高效感染hMSCs，hMSCs感染重组慢病毒后可高效表达hCCRl。.TransweⅡ体外迁移实验表明，hcCRl基因转染的hMscs向肝癌细胞条件培养基的趋向迁移能力.明显增强[(134．8±15．7)／LPF对比(83．5±10．9)／LPF，f=10．40，尸<0．0l】。体内迁移实验.显示，hMSCs经尾静脉注射后14 d，到达小鼠肝癌部位的hMsCs-hCCRl显著多于hMSCs—RFP.[(86．7±14．1)／HPF对比(54．5±9．6)／HPF，f=一7．32，尸<0．01]。结论ccRl基因过表达.可显著增强骨髓MSCs靶向肝癌迁移的能力，提示开发迁移能力更强的细胞载体及MSCs的临床应.用具有重要的意义。