A Mini Review on Capillary Isoelectric Focusing-Mass Spectrometry for Top-Down Proteomics.
A Mini Review on Capillary Isoelectric Focusing-Mass Spectrometry for Top-Down Proteomics.
复制标题
DOI：
10.3389/fchem.2021.651757
复制
发表时间：
2021
影响因子：
5.5
通讯作者：
Sun L
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Xu T;Sun L
基于质谱（MS）的自上而下蛋白质组学（TDP）需要在电喷雾电离（ESI）-MS和串联质谱（MS/MS）之前对蛋白质组进行高分辨率分离。毛细管等电聚焦（cIEF）-ESI-MS和MS/MS可能是TDP的理想方法，因为cIEF可以基于其等电点（pI）以超高分辨率分离蛋白质型。自20世纪90年代以来，cIEF-ESI-MS在蛋白质表征方面得到了广泛认可。然而，cIEF-MS用于蛋白质型表征的广泛采用受到几个技术挑战的阻碍，包括缺乏用于将cIEF与MS偶联的高度灵敏和稳健的ESI接口，ESI抑制来自两性电解质的分析物，以及需要手动操作。在这篇简短的综述中，我们总结了cIEF-ESI-MS用于表征蛋白质组的技术改进，并强调了最近在疏水蛋白、尿白蛋白变体、单克隆抗体的电荷变体和复杂蛋白质组的大规模TDP方面的一些应用。
Mass spectrometry (MS)-based top-down proteomics (TDP) requires high-resolution separation of proteoforms before electrospray ionization (ESI)-MS and tandem mass spectrometry (MS/MS). Capillary isoelectric focusing (cIEF)-ESI-MS and MS/MS could be an ideal method for TDP because cIEF can enable separation of proteoforms based on their isoelectric points (pIs) with ultra-high resolution. cIEF-ESI-MS has been well-recognized for protein characterization since 1990s. However, the widespread adoption of cIEF-MS for the characterization of proteoforms had been impeded by several technical challenges, including the lack of highly sensitive and robust ESI interface for coupling cIEF to MS, ESI suppression of analytes from ampholytes, and the requirement of manual operations. In this mini review, we summarize the technical improvements of cIEF-ESI-MS for characterizing proteoforms and highlight some recent applications to hydrophobic proteins, urinary albumin variants, charge variants of monoclonal antibodies, and large-scale TDP of complex proteomes.
登录
查看更多内容
影响因子：
7.4
作者：
Chen B;Brown KA;Lin Z;Ge Y
通讯作者：
Ge Y
影响因子：
7.4
作者：
Lubeckyj RA;McCool EN;Shen X;Kou Q;Liu X;Sun L
通讯作者：
Sun L
DOI：
10.1007/s13361-019-02167-w
发表时间：
2019-08-01
影响因子：
3.2
作者：
Lubeckyj, Rachele A.;Basharat, Abdul Rehman;Sun, Liangliang
通讯作者：
Sun, Liangliang
影响因子：
2.9
作者：
Maxwell, E. Jane;Zhong, Xuefei;Chen, David D. Y.
通讯作者：
Chen, David D. Y.
DOI：
10.1007/s13361-016-1532-8
发表时间：
2017-04-01
影响因子：
3.2
作者：
Choi, Sam B.;Zamarbide, Marta;Nemes, Peter
通讯作者：
Nemes, Peter